環境條件
無菌環境：---和無菌是體外培養細胞的首要條件。細胞在活1體內，解1毒系統和免1疫系統可抵抗微生物或其他---的侵入，但細胞在體外培養的過程中，缺乏機體免1疫系統的保護而喪失對微生物的防御能力和對---的解1毒能力。為---細胞能在體外環境中生長繁殖，必須要---無菌工作區域、---的個人衛生、無菌試劑和培養基以及無菌操作。
常見的微生物污染有支原體、---、---。支原體無致死毒性，可與細胞長期共存，對細胞有潛在影響，但體積小，不易鑒別，可借助于地衣紅或hoechst33342染色來進行檢測。---增殖快，在短時間內即可大量擴增，并產生毒1素殺1---。---的種類繁多，肉眼可見，漂浮于培養液面上，可呈絲狀、管狀或樹枝狀等。
細胞凍存
細胞密度達到80%～90%時，ips細胞相關，去培養基，10ml pbs清洗2次。加入3ml含0.25%edta的胰蛋白酶，放人細胞培養箱3min。加入lmldmem完全培養基終止胰酶---，轉移至15ml離心管。加入10ml pbs清洗細胞培養盤，轉移至15ml離心管，2000rpmx2min，棄上清液。
加入lml凍存液90%血1清，10%dmso，放入凍存盒內盒內有---1醇，以---溫度降低的速度，立即放入一80℃冰箱內，過夜，第二天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。
凍存液的配制：70%的完全培養基+20%fbs+10%dmso.dmso要慢慢滴加，邊滴邊搖。
ips細胞與胚胎es形態相似、核型、端粒酶活性、體外分化潛能均相同，同時也能夠表達相同的表面標志分子。es細胞和ips細胞具有相同的基因。不同的是，es細胞中的與細胞多能性有關的基因能夠表達，如：oct4，sox2等。而已分化的體細胞中的這些基因不能表達。通過導入與多能性有關的外源基因來喚醒體細胞中的多能性基因，從而使體細胞從分化狀態重編程為多能性ips細胞。
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