1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養液，混勻；
3. 離心， 1000rpm，凍存袋供應商，5min；
4. 棄去上清液，加入含10%小牛血培養液重懸細胞，計數，調整細胞密度，接種培養瓶，37℃培養箱靜置培養；
5. 次日更換一次培養液，繼續培養。
1.操作人員應戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。
3.將新鮮培養基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。
4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，以7o%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內。
5.取出解凍之細胞懸浮液，緩緩加入有培養基之培養容器內(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，cs250凍存袋供應商，放入培養箱培養。取0.1m1解凍細胞懸浮液作存活測試。
6.解凍后是否立即去除冷凍保護劑，依細胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑。
目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養瓶中進行培養，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除 dmso，去除---，cs50凍存袋供應商，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了會受壓過大， 。此外在操作過程中容易污染，所以不。另一種說法為細胞懸液中含有二---dmso，dmso對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液 體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規的離心分裝的方法進行復蘇，結果無有異常。
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