單核苷酸-友名生物

t4 rna連接酶

用途：用rna 3末端標記；rna和rna分子間連接；寡核苷酸的環化；trna修飾；5 race中寡核苷酸連接到cdna單鏈；在蛋白質特定位點引入非天然---酸。

來源：由大腸桿1菌表達，表達基因的來源為t4嗜菌體。

活性定義：37℃30分鐘內，催化1 nmol 5-[p]-(a)12-18成為磷酸酶不能---的環形產物所需的酶量定義為1個活性單位。

活性檢測條件：50mm tris-hcl(ph7.5)，10mm mgcl2，10mm dtt，1mm atp，10μm 5-[p]-(a)12-18(10μm in 5-termini)。

純度：不含dna內切酶和外切酶，不含rna酶，不含磷1酸酯酶。

酶儲存溶液：10mm tris-hcl(ph7.5)，1mm dtt，50mm kcl，0.1mm edta，50%(v/v)glycerol。

reaction buffer(10x)：500mm hepes-naoh(ph8.0 at 25℃)，100mm mgcl2，100mm dtt。

dna連接酶與dna聚合酶用途不同

dna連接酶主要用于基因工程，將由---性-內切酶“剪”出的粘性末端重新組合，故也稱“基因針線”。如基因工程中，大腸桿1菌連接酶連接黏性末端，t4連接酶既可連接黏性末端，又可連接平末端。

dna聚合酶在dna copy中起做用，主要是連接dna部分片段與單個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。