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低溫保存法
簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;
液氮---溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如---、噬菌體、多種---、酵母和原蟲、---是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
脫水存法
沙土保存法,能產孢子的---及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養基上生長---的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經真空抽干,外觀呈松散狀態,于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑一般用脫脂牛奶相混合,放在安瓿管內于-20~-30℃的---浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用氧化磷或干冰使水汽結凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
石蠟油封存法,在斜面菌種培養物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
實驗室的傳代保藏過程
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