細(xì)胞名稱: ---c crl-1932(786-o)細(xì)胞, 786-o細(xì)胞, 786o細(xì)胞,人腎透明細(xì)胞xian ai細(xì)胞
種屬來源: 人
組織來源: 腎
特 征: 腎細(xì)胞xian ai
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
培 養(yǎng) 基: rpmi-1640,90%;fbs,10%。
生長條件: 氣相:空氣,95%;---,5%; 溫度:37 ℃,
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
安全等級: 1
應(yīng) 用: 該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
str:
amelogenin: x,y
csf1po: 10
d13s317: 8
d16s539: 12
d5s818: 9
d7s820: 11,12
tho1: 6,9.3
tpox: 8,11
vwa: 15,17
此細(xì)胞源自一個原發(fā)性透明細(xì)胞癌。 此細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂是生長。 此細(xì)胞生成的一個pth樣的多肽與乳ai和fei ai中的肽相似。 這個多肽的n端與pth相似,活性與pth相似,分子量為6000道爾頓。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測。此細(xì)胞源自一個原發(fā)性透明細(xì)胞癌。 此細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂是生長。 此細(xì)胞生成的一個pth樣的多肽與乳ai和fei ai中的肽相似。 這個多肽的n端與pth相似,活性與pth相似,分子量為6000道爾頓。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測。
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或---污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
1復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1ml 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng) 過夜。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2細(xì)胞傳代:如果
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶 中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞---情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
3細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)---時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 t25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞, 根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 dmso,輕輕混勻,dmso 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍 存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細(xì)胞因子 等,---細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶 自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì) 胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼 壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常, 請將細(xì)胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)?您再免費(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8ml 維持細(xì)胞正常培 養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì) 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系 ,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的------回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。