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人PANGGUANG移行細胞AI

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2022-6-27   182.100.106.*
聯系方式
周舟13524933993 021-54222852
聯系地址
閔行區元江路5500號第1幢C971室
上海酶聯生物科技有限公司為您提供人pangguang移行細胞ai。




細胞名稱: 人pang guang移行細胞ai
種屬來源:
組織來源: pang guang
特      征: 移行細胞ai
細胞形態: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培 養 基: l-15培養基,90%;fbs,10%。
生長條件: 氣相:空氣,95%;---,5%; 溫度:37  ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養基+10% dmso,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
安全等級: 1


特點和簡介
1974年a. leibovitz從---期移行細胞liu中建立了sw細胞株。huan zhe接受過術前hua liao(thiotepa)。 bao dao稱此細胞的植板率為41%。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測。


接受后處理
1)  收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
 
2)  請先在顯微鏡下確認人pang guang移行細胞ai生長狀態,去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養約2-3h。
 
3)  棄去t25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
 
4)  如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
 
5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或---污染,請及時與我們取得聯系。
 
培養操作
1復蘇細胞:將含有 1ml 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4ml 培養基混合均勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2ml 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜。第二天換液并 檢查細胞密度。
 
2細胞傳代:如果人pang guang移行細胞ai密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
 
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤洗細胞 1-2 次。
 
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中--- 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞---情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消 化。
     
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2ml 培養液后吹勻。
 
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
 
3細胞凍存:待細胞生長狀態---時,可進行細胞凍存。下面 t25 瓶為類;
 
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止---,可使用血球計數板計數。
 
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血 清和 dmso,輕輕混勻,dmso 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
 
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。



培養注意事項
1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及時和我們聯系。
 
2.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子等,---細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。


3.用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
 
4.靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8ml 維持細胞正常培養,待細 胞匯合度  80%左右時正常傳代。
 
5.請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
 
6.建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 我司技術 部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們的------回訪直至問題解決。 


7.該細胞僅供科研使用。


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