對(duì)于需要保存5年以上的體外細(xì)胞的方法,-196°℃的深低溫液氮保存簡(jiǎn)便,實(shí)用.凍存后的細(xì)胞損傷小活力高能保障---移植后造血功能的早期恢復(fù),反之則導(dǎo)致造血功能恢復(fù)的---甚至失敗.原有的液氮罐保存方式是將裝有千細(xì)胞的凍存袋放入圓筒狀的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于凍存袋與圓筒狀的容器形狀尺寸的不匹配冷凍保存時(shí)會(huì)造成凍存袋的變形導(dǎo)致千細(xì)胞被擠壓受損甚至消滅,且受液氮罐空間---能凍存的數(shù)量有限.針對(duì)如何經(jīng)濟(jì),較大容量的保存細(xì)胞.
生長(zhǎng)---之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基、dmso、無(wú)菌塑料冷凍保存管(nalgene 5000-0020)、等速降溫機(jī)
(1)傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘--->;-20℃30分鐘--->;-8o℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->;液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止胞內(nèi)冰晶過(guò)大,凍存袋報(bào)價(jià),造成細(xì)胞大量消失,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-8o℃冰箱中。
(2程序降溫:利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至-8o℃以下) -120℃,凍存袋供應(yīng)商,再放在液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。
公開(kāi)了一種細(xì)胞凍存袋樣本臨時(shí)儲(chǔ)罐,儲(chǔ)罐本體設(shè)有罐體,200-074-401凍存袋批發(fā),罐蓋,凍存架儲(chǔ)存格結(jié)構(gòu),罐體和罐蓋可將儲(chǔ)罐本體形成密封腔體,罐體頂部為密封結(jié)構(gòu),罐體頂部設(shè)有圓孔,罐蓋的尺寸和圓孔的尺寸相互匹配,平谷區(qū)凍存袋,罐蓋可覆蓋在圓孔之上形成密封腔體,所述的凍存架儲(chǔ)存格結(jié)構(gòu)包括軸承,軸承底部設(shè)有底盤(pán),底盤(pán)上設(shè)有隔板.隔板的數(shù)量為多個(gè),多個(gè)隔板將底盤(pán)分隔為多個(gè)儲(chǔ)存格.通過(guò)設(shè)計(jì),縮小了蓋口,減少了液氮逃逸,節(jié)省成本,凍存架放置于單獨(dú)的格子里有利于凍存位置管理,達(dá)到快速取放,尤其是整體凍存架快速取放轉(zhuǎn)移的目的.