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水有--- 可以不過濾?
原因有以下兩點點:
1流動相過濾在理論上有好處,但是實際操作時由于不可能做到專瓶---,反而容易造成的交叉污染,對于配比復雜的流動相影響。
2流動相過濾在經濟成本上不---。買一套過濾裝置要6000多元,且過濾器---是比較容易損壞的設備。是過濾片的成本太高,一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算,過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本上升。
色譜法的應用可以根據目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。制備性色譜的目的是分離混合物,獲得一定數量的純凈組分,這包括對有機合成產物的純化、天然產物的分離純化以及去離子水的制備等。相對于色譜法出現之前的純化分離技術如重結晶,色譜法能夠在一步操作之內完成對混合物的分離,但是色譜法分離純化的產量有限,只適合于實驗室應用。制備色譜到底是什么?(1)分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率,制備色譜的的進樣品量很大,導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長度,使用的相對多的流動相。然而,當色譜柱上樣品負載加大的時候,往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品。制備色譜,要解決容量與柱子效果之間的矛盾,對重現性也要考慮。從經濟上來說。制備色譜要爭取少用填料,少用溶劑,要盡可能多的得到產品。(2)樣品的前處理:制備色譜柱子由于處理的樣品多,比分析柱子更容易受污染,所以,---的前處理就顯得非常的---。萃取、過濾、結晶、固相萃取等簡單的分離方法,如果用得上,而且還不是很麻煩,就要盡可能多的采用以去掉雜質。(3)固定相的選擇硅膠、鍵合固定相(如c18)、離子交換樹脂、聚---、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。 有不少文獻---,對填料可以進行一下處理提高了分離效果,如,對硅膠進行的(或緩沖液)處理。
色譜分離原理
液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。
1.液固色譜法 使用固體吸附劑,被分離組分在色譜柱---離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附-解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組分,大多數用于非離子型化合物,離子型化合物易產生拖尾。常用于分離同分異構體。
2.液液色譜法 使用將特定的液態物質涂于擔體表面,或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相,分離原理是根據被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是一個分配平衡過程。
涂布式固定相應具有---的惰性;流動相必須預先用固定相飽和,制備液相,以減少固定相從擔體表面流失;溫度的變化和不同批號流動相的區別常引起柱子的變化;另外在流動相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復雜化。由于涂布式固定相很難避免固定液流失,現在已很少采用。現在多采用的是化學鍵合固定相,如c18、c8、---柱、基柱和柱。
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