原理
原位雜交技術(shù)是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細胞內(nèi)待測的-復(fù)性結(jié)合而使得組織細胞中的特--得到定位，并通過探針上所標(biāo)記的檢測系統(tǒng)將其在-的原有位置上顯示出來。
經(jīng)特定標(biāo)記的核苷酸鏈為探針，植物rna原位雜交技術(shù)服務(wù)，可與組織切片、細胞或染色體標(biāo)本中的待檢dn-段或mrna進行雜交，然后顯示標(biāo)記物，從而分析待檢-的分布和含量。利用此項技術(shù)可研究各種基因在染色體上的定位，編碼某種蛋白質(zhì)的mrna在胞質(zhì)中的表達。
水稻種子是人類重要的食物來源，其發(fā)育涉及一個復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。mads轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子，已有的研究表明，幾乎所有的水稻mads基因都在種子中表達，但對mads家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。
在這項研究中，研究組基于前期的表達譜研究基礎(chǔ)，分析得到了一個在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達的轉(zhuǎn)錄因子mads29。細致分析表明，mads29在花藥、胚珠和種子中均表達，且在受精后的母體組織表達量高。mads29的反義轉(zhuǎn)1基因植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實驗和全基因組表達譜芯片分析等，研究人-明了mads29通過調(diào)控程序化死1亡(pcd)過程促進珠心細胞和珠心突起處的降解。進一步的體外凝膠阻滯實驗顯示，mads29能夠通過直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)基因的啟動子區(qū)域而調(diào)控其表達，進而影響胚乳發(fā)育。
登錄后臺
