南京江苑生物科技有限公司為您提供293t,hek-293t,人胚腎細胞。細胞簡介
人胚腎細胞株293插入sv40 t-抗原基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293t。該細胞初的名字293tsa1609neo,攜帶sv40序列,被廣泛用于逆轉錄生產、基因表達和蛋白表達。
運輸和保存
1.1 ml凍存管包裝干冰運輸,收貨后-80℃冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇。若發現干冰已經揮發干凈、凍存管蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2.t25瓶培養的細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
培養瓶細胞接收后的處理
1.收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁,拆下封口膜,放入37℃,5% co2培養箱中靜置3-4 h,以穩定細胞狀態。若發現培養瓶破損、有液體溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2.請在顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照,10倍和20倍各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后依據。
3.細胞收貨脫落:293t細胞貼壁能力弱,收貨如有大面積脫落的細胞團為正常現象。若細胞在快遞運輸途中因振動脫落,先將培養瓶放入37℃,5%co2培養箱中靜置3-6 h,讓少數脫落的細胞可再附著生長。若仍有脫落的細胞,則 (1) 收集所有細胞懸液,1000 rpm離心5 min,保留沉淀;(2) 添加胰蛋白酶液0.5 ml至離心管中,重懸沉淀,置于37℃1-2 min左右;(3) 向離心管內加入5 ml完全培養基終止;(4) 1000 rpm,離心5 min,丟棄上清,用5 ml完全培養基補加1-5% fbs,促進貼壁重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;(5) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
4.收貨細胞的培養和傳代:在顯微鏡下觀察細胞生長狀態,若細胞生長密度在60%以下,可去除培養瓶中的灌液培養基,加入新配制的完全培養基,置于培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達80%-90%以上,可以對細胞進行傳代處理。
5.運輸用的培養基灌液培養不能再用來培養細胞,請換用合適的新鮮培養基來培養細胞。
凍存細胞接收后的處理
收貨后-80℃冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇。
細胞復蘇:將含有1 ml細胞懸液的凍存管置于37℃水浴中迅速搖晃解凍,回溫后噴以75 %酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。將凍存管中細胞加入到含4-6 ml完全培養基的離心管中混合均勻。1000 rpm離心3-5 min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入培養瓶/培養皿中,培養箱中孵育。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
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