產(chǎn)品全稱：
英文簡稱：porcine eg-vegf (endocrine gland derived vascular endothelial growth factor) elisa kit
貨號：goy-p3107
規(guī)格：48t/98t
服務(wù)：可提供免費(fèi)代測服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供
1進(jìn)口抗體——---、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3---的優(yōu)化方案——回收利用率高、---性強(qiáng)
4適用于---、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、---因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測定標(biāo)本中aif水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗體、hrp標(biāo)記的親和素，經(jīng)過---洗滌后用底物tmb顯色。tmb在---化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的aif呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度od值，計算樣品濃度。簡易原理示意圖如下：
1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根---化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根---化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
3洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
9洗板，同4。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
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