北京博爾西科技有限公司為您提供strep tactin瓊脂糖凝膠ff。提示：本公司全部產品均為科研實驗使用試劑，非---用途、非食品、非體外診斷試劑，不可用于動物及人體！
strep-tactin瓊脂糖凝膠ff
strep-tactin berpharose ff
1. 產品介紹
strep-tactin瓊脂糖凝膠ff是一種將strep-tactin鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質，主要用于純化strep ii標簽蛋白。strep ii標簽為8個---酸的小標簽wshpqfek，由于標簽小，僅為1kda左右，一般不影響融合后蛋白質的結構和功能，常用于融合表達蛋白質的檢測和純化。
本產品的配基strep-tactin是鏈霉親和素streptavidin的突變體，與鏈霉親和素相比，strep-tactin對strep ii標簽的親和能力至少強10倍以上，能夠在溫和的條件下與strep ii融合蛋白結合和解離。由于strep-tacin對strep ii標簽具有高度特---，一般一步純化就能獲得高純度的蛋白質樣品。
strep ii標簽蛋白與凝膠結合后可使用脫硫生物素競爭方式進行洗脫，該洗脫方式比較溫和，一般不會影響蛋白質的性質。如蛋白質---受一定的堿，也可用堿液洗脫，比如10mm naoh等。strep-tactin瓊脂糖凝膠ff---受較高的堿清洗，可以用0.5m naoh進行再生清洗和去除熱源等。另外，2-(4-------唑)------haba也可用于凝膠再生，過量的haba能夠競爭下脫硫生物素，并且在無haba的緩沖液中，能將凝膠上的haba洗脫。
2.規格
1ml預裝柱、5ml預裝柱、10ml預裝柱、20ml、100ml、500ml
3.產品性能
性能 指標
基質 6%瓊脂糖微球
配基 strep-tactin
配基密度 ***5mg/ml
載量 ***6mg/ml strep ii標簽蛋白
粒徑 45-165μm
流速/---流速 20-100/700 cm/h
耐反壓 0.3mpa
ph穩定范圍:短時間/長時間 2~13/4~11
儲存緩沖液 20%---
儲存溫度 4-8℃
4.純化流程
緩沖液
純化strep ii標簽蛋白
結合緩沖液：100mm tris-hcl，150mm nacl，1mm edta，ph8.0；
或20mm nah2po4，280mm nacl，6mm kcl，ph7.4
洗脫緩沖液：結合緩沖液+ 2.5mm脫硫生物素；或10mm naoh
再生緩沖液：0.5m naoh；
或結合緩沖液+1mm haba
樣品準備
上柱的樣品應盡量保持與結合緩沖液一致。通常可用透析、超濾、稀釋等方法處
理樣品。并且上柱前應過0.45μm濾膜或高速離心去除不溶物。
樣品純化
1平衡：取適量的strep-tactin瓊脂糖凝膠ff裝入合適的層析柱中，用蒸餾
水清洗5個柱體積去除保存液，再用結合緩沖液平衡5個柱體積，建議流速為100cm/h。
2上樣：將準備好的樣品上柱，建議流速為20-100cm/h，可根據實際結合情
況選擇流速，能獲得較好的---。
3再平衡：上樣后用結合緩沖液平衡10個柱體積以上，或平衡至基線，洗去
雜質，流速為100cm/h。
4洗脫：用洗脫緩沖液洗10-20個柱體積，建議流速為100cm/h，收集的洗脫
液應立即調節ph至穩定范圍，并根據需要置換緩沖液。
5naoh再生：洗脫目的蛋白后的柱子用蒸餾水清洗3-5個柱體積，并用0.5m
naoh再生3-5個柱體積，再用蒸餾水清洗至中性，用20%---保存柱子，或進行下一次純化。
6haba再生：用脫硫生物素洗脫目的蛋白的，還可以用haba緩沖液再生，
一般用haba的結合緩沖液洗15個柱體積，再用結合緩沖液洗30個柱體積，然后可以用20%---保存柱子，或進行下一步純化。haba上柱后凝膠顏色會變為紅橙色，在結合緩沖液平衡后會恢復正常的白色，這種再生方式一般使用體積會大些。
5.注意事項：
1)使用時---柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內產生氣泡，影響純化---。
2)本產品保存條件為20%---，4~8℃。
3) 2-25℃,常壓,避光運輸
4僅供科研實驗使用
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