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博奧龍公司主要產品有抗0體制備全套產品、---包裝相關產品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個物種和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等標記二抗;品類齊全的內參標簽抗0體;另有wb、ihc、elisa、細胞培養相關試劑及諸多特色產品和特色技術服務。
單克0隆抗0體單抗制備制備過程有以下幾個步驟:
步驟一:細胞免0疫
免0疫動物免0疫動物是用目的抗原免0疫小鼠,使小鼠產生致敏b淋巴細胞的過程。 一般選用6-8周齡雌性balb/c小鼠,按照預先制定的免0疫方案進行免0疫。 抗原通過---循環或淋巴循環進入外周免0疫器0官,---相應b淋巴細胞克0隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏b淋巴細胞。
步驟二:細胞融合
采用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作取出脾0臟,在平皿內擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨0髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙 二醇。在聚乙 二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨0髓瘤細胞發生融合,形成雜交瘤細胞。
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product_name:山羊抗人igg?fab
category:抗原抗0體
concentration:見管體標簽
純化方法:特異親和純化
批號和有效期:見管體標簽
稀釋液/緩沖液:0.01m pbs,ph7.4
使用濃度:optimal concentrati0ns should be determined by the end user
運輸及保存條件:4℃運輸,-20℃避光保存
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取血:
免0疫一周后,可以耳動脈取血檢測抗0體效價。因為起初幾次免0疫產生的抗0體的效價比較低,頭兩次取血,夠檢測用即可。在三次免0疫后,可以獲得較高0效價的抗0體,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否則會造成兔子貧0血。
前幾次取血用19號針頭對兔子進行耳動脈取血,室溫過夜析出血0清。
zui后一次取血可以采用頸動脈放血,具體操作如下:
1、家兔仰臥于兔架上固定頭部,用紗布固定四肢。頭部略放低以暴露頸部。剃毛并消毒皮膚。
2、沿頸部中線用手術刀切開皮膚約10cm,分離皮下結締組織,直至暴露出氣管兩側的胸鎖乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血鉗止血)。
3、用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區疏松組織,暴露出頸總動脈后用彎頭眼0科鑷使之游離,剝離神經和結締組織。
4、于動脈下套入兩根黑絲線,分別置于遠心及近心端。結扎遠心端的絲線。近心端的動脈用血管夾夾住。
5、用小拇指墊在血管下,用尖頭眼0科手術剪在兩根絲線間的動脈璧上剪一小口(勿剪斷),插入塑料放血管。再將近心端的絲線結扎固定于放血管上,以防放血管滑脫。
6、松開止血鉗,使---流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。