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e53333;>薄層層析硅膠板
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眾所周知,傳統色譜分離技術是采用固定的色譜塔進行,---入一定量物料,然后采用洗脫劑不斷洗脫,在同一出口在不同時間段就可接到不同的產品組分,此過程明顯費時費力;而連續色譜分離技術則是利用不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數,當兩相作相對運動時,這些物質隨流動相一起運動,并在兩相間進行反復多次的分配,從而使各物質達到分離。在實際生產中,連續流層析可獲得更高的產量,且成本---,這是通過降低protein a 填料用量和緩沖液消耗量實現的,由于操作穩定,其可---地---產品的一致性,并---提高下游純化的產量。傳統色譜分離方式通常是單一色譜柱序列上樣和洗脫,這就明顯---了介質的利用程度,而連續色譜層析技術平行采用多根色譜柱平行上樣和洗脫,這種連續上樣的方式無疑能夠 ffffff;>i
1.確定填料:先確認準備裝填的填料,并根據填料粒徑確定層析柱篩網。確定裝柱流速和壓力。
2.確定裝柱規模:確定目標裝柱體積,并計算所需層析柱的高度和內徑。
3.確定裝柱緩沖液。
4.準備對應的裝柱泵或者層析系統。
對于一些較難裝的填料,如ge sepharose hp, superdex pg 等,需要先恒流再恒壓的方法。即排氣完成后,以恒定流速壓膠⒉小時,然后在固定壓---膠45分鐘后,記下此時柱床的高度。再將柱頭壓到此高度下3mm位置,裝柱即完成。