---液相色譜法(hplc)是上個世紀七十年代迅速發(fā)展起來的一項---、快速的分析分離技術，是現代分離測試的重要手段。
色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
hplc是在---的液相色譜法基礎上發(fā)展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的---固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同，但填料精細，需高壓泵推動，柱效高，分析速度快。
與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和ph值可靈活調節(jié)，分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。
---液相色譜法的應用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，---液相色譜價格，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的---，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用---液相色譜法分析測定，---液相色譜多少錢，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20% ，而80% 則需用---液相色譜來分析。
現代色譜分析法是有效而快速的分離、分析手段，既可用于定性分析，又可用于定量分析。---液相色譜法與氣相色譜法的定性分析和定量分析方法包括測定方式和計算方法相同。在定性分析中，有用純物質對照的色譜鑒定法，還有收集餾分與化學方法或其他儀器分析方法聯(lián)用的非色譜鑒定法；在定量分析中，可以用峰高或峰面積以內標法、外標法或歸一化-量，并與微機聯(lián)用作為現代化的分析工具。
定性分析
色譜分析-性分析的目的就是確定每個色譜峰代表什么組分，從而確定由這些組分所構成的混合物試樣的組成。常用的主要定性方法有色譜鑒定法和非色譜鑒定法兩種。
1．色譜鑒定-性
色譜鑒定法就是用純物質對照定性，這是氣相和---液相色譜法中常用的方便的一種定性方法，可以和定量測定操作同時進行。
(1)利用保留值定性
在色譜條件一定的情況下包括柱長、柱內徑、固定相、柱溫、流動相及流速等，每一種物質都有其一定的保留值包括保留時間、保留體積、調整保留時間、調整保留體積等，一般不受其他組分的影響，---液相色譜，可以作為定性的根據。此法又稱為純物質對照定性。
在相同的色譜條件下，先測定未知物中每個色譜峰的保留時間或保留距離，再將要測的某純物質注入色譜儀，對照比較兩者的保留值，如果兩者的保留值相同，就可判定該未知物與已知純物質是同一種物質。
(2)利用加入純物質增加峰高-性
在穩(wěn)定的色譜條件下，為了區(qū)分兩個保留值保留時間或保留距離非常接近的組分，可以將某純物質直接加入到試樣中，再注入色譜儀，如果某組分峰的峰高增加了，表明這個色譜峰就是加入的純物質。此法又稱為純物質追加-性。
色譜鑒定-性需要有純物質對照，在沒有純物質時，可以用非色譜鑒定-性。
hplc是在---的液相色譜法基礎上發(fā)展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的---固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同，但填料精細，需高壓泵推動，---液相色譜，柱效高，分析速度快。與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和ph值可靈活調節(jié)，分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。
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