分離系統(tǒng)主要由色譜柱組成,是 氣相色譜儀 的-,它的功能是使試樣在柱內(nèi)運行的同時得到分離。色譜柱基本有兩類:填充柱和毛細管柱。填充柱是將固定相填充在金屬或玻璃管中常用內(nèi)徑4 mm。毛細管柱是用熔融二氧化硅拉制的空心管,也叫彈性石英毛細管。柱內(nèi)徑通常為0.1mm~0.5mm,柱長30m~50m,繞成直徑20cm左右的環(huán)狀。用這樣的毛細管作分離柱的氣相色譜稱為毛細管氣相色譜或開管柱氣相色譜,其分離效率比填充柱要高得多。可分為開管毛細管柱、填充毛細管柱等。填充毛細管柱是在毛細管中填充固定相而成,也可先在較粗的厚壁玻璃管中裝入松散的載體或吸附劑,然后拉制成毛細管。如果裝入的是載體,使用前在載體上涂漬固定液成為填充毛細管柱氣-液色譜。如果裝入的是吸附劑,反相色譜柱采購,就是填充毛細管柱氣-固色譜。這種毛細管柱近年已不多用。開管毛細管柱又分以下四種:壁涂毛細管柱。在內(nèi)徑為0.1mm~0.3mm的中空石英毛細管的內(nèi)壁涂漬固定液,這是目前使用*多的毛細管柱。載體涂層毛細管柱。先在毛細管內(nèi)壁附著一層硅藻土載體,然后再在載體上涂漬固定液。小內(nèi)徑毛細管柱。內(nèi)徑小于0.1mm的毛細管柱,主要用于快速分析。大內(nèi)徑毛細管柱。內(nèi)徑在0.3mm~0.5mm的毛細管,往往在其內(nèi)壁涂漬5μm~8μm的厚液膜。
1、在進行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應(yīng)當天配制以保持新鮮避免-產(chǎn)生。
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗c18色譜柱,以免柱性能損壞添加5%的沖洗色譜柱,同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡。
3、流動相需脫氣后使用,可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別,湖南反相色譜柱,應(yīng)該使用過度分布的形式進行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。
在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,反相色譜柱價格,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相。
色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理。
使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同,反相色譜柱多少錢,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。