動物睡眠剝奪模型,睡眠剝奪是研究睡眠的功能與發生機制的重要方法。睡眠剝奪模型的選擇將直接影響睡眠剝奪實驗的---性及準確性對睡眠剝奪實驗結果具有重要的影響。現將幾種常用的睡眠剝奪模型的方法評價及進展情況綜述如下。
1.平臺睡眠剝奪技術
此類方法主要是利用大鼠畏水及在水中無法進入睡眠的生活習性,通過在盛水的水槽中放置平臺,讓大鼠站立在平臺上,因平臺直徑足夠小(直徑 6.5 cm 或更小)當大鼠進入 rem 時,因全身肌張力降低引起節律性低頭觸水以此來達到剝奪 rem 的目的, 此類方法簡單易行無需復雜昂貴的設備,在不同條件的實驗室均能開展因而應用廣泛 其主要用來剝奪大鼠的rem ,可分為以下三種方法:
1.1單平臺睡眠剝奪法
此方法早于 1964 年被應用在貓的睡眠剝奪實驗中,動物模型,不久以后有人將此方法應用于大鼠的睡眠剝奪實驗,方法為將一圓柱形臺 (直徑約 65 m m )放置在長 400 mm寬340 m m高160 mm的水槽中,往水槽中加水至平臺露出水面約 10 mm ,將 1 只大鼠置于臺上,大鼠可在平臺上站立,動物行為學,可進入 nrem,當大鼠進入 rem 時全身骨骼肌張力明顯降低,頸部肌張力降低引起節律性低頭觸水從而無法進入 rem,采用 sp 實驗可引起動物的體重及胸腺重量減輕,上腺重量增加,血漿中上腺皮質酮增加,動物攻擊行為增加,機體反應抑制等。
實驗步驟
1、實驗之前,一定要---高架十字迷宮整個裝置的清潔。這個步驟不僅僅是要求當天的實驗,側重于每一次動物實驗完成后的清潔除味工作,一定要去除上一只動物在宮體內---下來的尿液、糞便等,盡可能創造一個清潔、無味道的理想試驗環境。同時,---前動物實驗,實驗員需要記錄動物的編號、日期、狀態等信息;實驗動物提前運送到行為學實驗室臨時籠架 ,
適應環境至少3h左右, 減少動物緊張。
2、將實驗動物大鼠或者小鼠從飼養籠中取出,實驗動物盡量背向實驗員,將動物輕輕放在儀器宮體的中央區域,動物細胞模型,動物面向開臂,然后實驗員迅速安靜的離開;
3、打開supermaze或者visutrack動物行為分析軟件,---動物在高架十字迷宮儀器內的軌跡運動,自動計算指標,通常實驗時長為5min;
4、實驗結束后,取出實驗動物,放入飼養籠,做好實驗完成動物的標記信息,同時,用酒精和紙巾清潔迷宮。
注意事項
1. 針頭大小與動物的種類有關,t 同時針頭一定要磨鈍。
2. 檢查灌注泵的運作情況,一定排出管子的氣泡和空氣,防止空氣栓塞。
3. 經腹腔暴腔,先清楚升主動脈外面的脂肪組織和心外膜組織。
4. 將針頭經左心室插入升主動脈顏色變白的哦,并用鉗子固定。
5. 解開右心耳,同時開啟灌注泵。注意,不要---揭開---的其他部位,否則有時候可能會灌注成功但是絕大部分會造成灌注不成功,尤其。
6. 將 4 度的生理鹽水好已動物的發白為標準,我們實驗室的大鼠約用 250ml和--- (根據所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整個過程均應將動物放在冰上,以便于---地保存目的蛋白和酶的活性。