mullis起初使用的dna聚合酶是 dna 聚合酶 i 的klenow片段,1988年初,keohanog改用t4 dna聚合酶進(jìn)行pcr,其擴(kuò)增的dn---段很均一,基因擴(kuò)增儀,真實(shí)性也較高,只有所期望的一種dn---段。但每循環(huán)一次,仍需加入新酶。1988年saiki 等從溫泉中分離的一株水生嗜thermus aquaticus 中提取到一種耐熱dna聚合酶。
此酶具有以下特點(diǎn):
耐高溫,在70℃下反應(yīng)2h后其殘留活性大于原來的90%,在93℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來的60%,在95℃下反應(yīng)2h后其殘留活性是原來的40%。
在熱變性時(shí)不會(huì)被鈍化,不必在每次擴(kuò)增反應(yīng)后再加新酶。
---提高了擴(kuò)增片段特---和擴(kuò)增效率,增加了擴(kuò)增長(zhǎng)度2.0kb。由于提高了擴(kuò)增的特---和效率,因而其靈敏性也---提高。為與大腸多聚酶iklenow片段區(qū)別,將此酶命名為taqdna多聚酶taq dnapolymerase。此酶的發(fā)現(xiàn)使pcr廣泛的被應(yīng)用。
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1、加熱模式:立體膜加熱技術(shù)
2、制冷技術(shù):新一代“peltier”效應(yīng)“半導(dǎo)體熱泵制冷”
[1]
3、控溫及管理:16位微機(jī)智能式
4、dtc型基因擴(kuò)增儀主要由外殼、變溫反應(yīng)腔、散熱系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、制冷系統(tǒng)、電子控制系統(tǒng)、供電系統(tǒng)、人機(jī)界面等各部分組成。
5、單機(jī)操作,基因擴(kuò)增儀公司,也可與電腦聯(lián)機(jī)使用,通過數(shù)據(jù)線可直觀顯示溫度變化曲線。
6、溫度范圍廣,除基本功能外還具備停電保護(hù),長(zhǎng)時(shí)間高低溫處理,低溫培養(yǎng),循環(huán)套循環(huán)等各種增強(qiáng)功能,能勝利包括科研、---、用戶試劑、進(jìn)口試劑、定性或定量等各種條件要求的pcr實(shí)驗(yàn)。
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實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀
在普通pcr儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量pcr儀。其pcr擴(kuò)增原理和普通pcr儀擴(kuò)增原理相同,只是pcr擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特---結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。把這pcr儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀(qpcr儀)。熒光定量pcr儀有單通道,基因擴(kuò)增儀價(jià)格,雙通道,和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候,選用單通道,有多熒光標(biāo)記的時(shí)候用多通道。單通道也可以檢測(cè)多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物,因?yàn)橐淮沃荒軝z測(cè)一種目的基因的擴(kuò)增量,需多次擴(kuò)增才能檢測(cè)完不同的目的基因片段的量。該儀器主要用于醫(yī)學(xué)---檢測(cè),生物醫(yī)研發(fā),食品行業(yè),科研院校等機(jī)構(gòu)。
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