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博奧龍公司主要產品有抗0體制備全套產品、---包裝相關產品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個物種和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等標記二抗;品類齊全的內參標簽抗0體;另有wb、ihc、elisa、細胞培養相關試劑及諸多特色產品和特色技術服務。
多抗制備的概念:由多個b淋巴細胞克0隆所產生的,受到多種抗原決定簇---并可與多種抗原表位結合的抗0體。多抗制備主要包括以下幾個步驟:免0疫動物、佐劑、免0疫原、免0疫、取血等。
多抗制備的制備步驟
一、器材
剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼0科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼0科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術-,塑料放血管,紗布等。
二、試劑
生理鹽水
弗氏完全佐劑
弗氏不完全佐劑
二甲0---,酒精棉,脫脂棉,2% nan3
三、免0疫原:蛋白或klh偶聯的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。
四、兔子的選擇
兔子的重量應在四斤以上,兩耳光滑,明顯可見耳靜、動脈,健康。
五、免0疫
用生理鹽水稀釋免0疫原,然后與相應的佐劑進行1:1混合?乖妥魟┩耆旌闲纬煞定的乳劑,將該乳劑在兔子雙肩周圍的皮膚下進行皮下0注射和后大腿進行肌肉注射。每個區域大約用1/4的免0疫原。這樣免0疫原可以---存在從而提高免0疫應答。
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如果機體內b細胞缺失或減少,人體因缺乏抗0體往往反復出現微生物所致的,常引起膿皮病、化膿性、、氣管炎和等;患的人,igg、iga都有一定的;患慢性淋巴細胞性的人則屯iga和igm降低。
b細胞和t細胞一樣,在未接觸抗原之前,不能產生效應。必須受到抗原---,并在輔助t細胞和巨噬細胞協助下,經過抗原與抗原受體相互識別,d細胞進入狀態,通過增殖轉變為有效應的漿細胞后,才能產生抗0體。
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注:
抗原注射以前需要收集一些正常血0清,已備檢測抗0體時作為陰性對照。待兔子在新環境中穩定,大概需要四天左右時間,可以進行耳動脈取血。取血量約5ml足矣。
免0疫用的抗原必須純化,否則影響抗0體的?乖沠ca或fia充分乳化后才能注射。將抗原液與佐劑等比例混合后,置于混合器上使之劇烈振蕩使抗原充分乳化,乳化過程比較費時、費力,但若乳化不充分,會影響免0疫的效果,振蕩后,1000rpm離心一分鐘,如水相和油相不分層即可注射。首0次免0疫用fca,以后都用fia。
免0疫方法可采用背部多點注射法。即于家兔脊柱兩旁選4-6點皮下0注射,每點注0.1ml,間隔2周后再于上述部位選不同點注射(不要選擇臨近位點,否則---愈合不好)。每次免0疫的抗原量約100μg。免0疫次數在四五次即可,抗原用量大可以減少次數。