目前市面上常用的程序降溫儀工作原理是：通過微處理器控制系統(tǒng)和電磁閥，控制噴入腔體中的液氮量來控制降溫速率。其優(yōu)點(diǎn)是：控溫，受外界環(huán)境影響小。尤其是處理大體積樣本時(shí)，快速噴入的大量液氮更易帶走樣本中的潛熱，從而快速降溫，------的樣本復(fù)蘇活性。樣品在相變過程中(液態(tài)->;固態(tài))會(huì)釋放大量潛熱。當(dāng)潛---出現(xiàn)，凍存液開始結(jié)冰時(shí)，樣本開始釋放熱量，溫度可能反而會(huì)上升。此時(shí)，就需要向腔體內(nèi)迅速噴入大量液氮，從而快速降溫，拉大溫差，帶走熱量，使得生物樣本迅速越過相變期。
步驟：(1)冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。(2)配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、，逐滴加入二--- (dmso)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。(3)離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。(4)取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(dmsozui后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示完全之冷凍保存管中，恒溫試管架，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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