使用方法
1. 用生理鹽水將抗原稀釋到2倍zui終濃度按每針次50μl用量配制。
備注：使用的抗原用量為
1免0疫原性較弱的合成肽每針次10-100μg；
2亞單位蛋白抗原每針次1-10μg；
3免0疫原性較強的滅活病原微生物和---樣顆粒抗原每針次1-10μg；
4腫0瘤細胞裂解物每針次10-100μg。
2. 37oc水浴中解凍佐劑，充分混勻，無菌條件下取出所需用量按每針次50μl與抗原按體積比1:1混勻。
3. 通過后腿小腿肌肉或腹0股0溝皮下0注射免0疫小鼠，每只小鼠注射100μl。
4. 第7天按同樣方式加強免0疫1針。備注：每次免0疫佐劑和抗原現配現用
5. 第014天通過elispot、胞內細胞0因子染色、mhc四聚體染色或其他可行方法檢測脾0臟或---淋巴0結中的抗原特---cd4+ th1和/或cd8+ ctl反應。
通過后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠視頻，2周快速鼠多抗制備佐劑，每只小鼠注射100μl。
備注：本佐劑與抗原混合后產生沉淀屬正常現象，抽入針管前應充分混勻，抽入針管后應盡快注射。
第21天按同樣方式加強免0疫1針。
備注：每次佐劑和抗原現配現用。
第35天采微量尾血進行elisa測定，抗0體滴度應在1:10000-1:10000000范圍內，隨后即可采全血或按常規方法進行抗原沖擊免0疫和脾細胞融合。
結 果
一、兩種免0疫方式小鼠血0清效價比較
對兩組試驗動物在完成了基礎免0疫后，尾靜脈采集少量---，分離血0清，進行間接elisa測定抗0體效價，檢測結果見圖1。由圖中數據可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0體效價即達到1：104。兩組數據經生物學統計軟件spss(windows 13．0版)進行t檢驗，統計結果差異極---(p(0．001)。
二、兩種免0疫方式小鼠融合率比較
在細胞融合后約7～10 d可見孔內雜交瘤細胞生長，當細胞融合成片達孔底面積的35％～50％時，用elisa檢測特---抗0體。兩組免0疫小鼠細胞著。改良法耗費時間短，但獲得的抗0體效價更高。
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