8周標準兔多抗制備佐劑-博特龍(在線咨詢)

抗原制備及純化

抗原制備: 參照文獻［10］制備 mrj 抗原。復蘇pet28a-mrj 轉 rosetta 菌0種 接 種 于 具 kana 抗 性 的10 ml液體培養基中的，37 ℃ 培養過夜，次日以 1∶ 50轉瓶進行擴大培養，當菌液 od600達 0． 6 時加入濃度為 5 mmol /l 的 iptg，8周標準兔多抗制備佐劑，37 ℃ - 8 h 超聲碎裂后進行考馬斯亮藍染色檢驗，有目的蛋白的大量表達。抗原大量制備及純化: 以 5 × 10 -4 mol /l 濃度的iptg，37 ℃ 條件下大量-( 200 ml 菌液) 8 h 后收集樣品，超聲裂解后將所得 mrj 蛋白過 ni-ida 凝膠柱親和純化，考馬斯亮藍染色后檢測目的蛋白純度高于 90% ，可用于單克0隆抗0體制備動物免0疫的抗原。

飼養層細胞制備

于細胞融合前---，準備飼養層細胞，常選用小鼠腹腔滲出細胞，其中主要是巨噬細胞和淋巴細胞。應用腹腔滲出細胞的好處是: 一方面做飼養細胞，另一方面巨噬細胞可以吞噬死0亡的細胞和細胞碎片，為融合細胞的生長造成---的環境。腹腔細胞的數目應適宜，過少則不能提供雜交瘤細胞所需要的生長因子，過多會阻礙雜交瘤細胞的貼壁，一般以鋪滿孔底 30% 為好。