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博奧龍公司主要產品有抗0體制備全套產品、---包裝相關產品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個物種和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等標記二抗;品類齊全的內參標簽抗0體;另有wb、ihc、elisa、細胞培養相關試劑及諸多特色產品和特色技術服務。
actin即肌動蛋白,是細胞的一種重要骨架蛋白。同時actin在細胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic streaming和cytokinesis等過程中起重要作用。actin在不同物種之間高度保守,以至于很難獲得較好的針對actin的抗血0清。actin大致可分為六種,其中四種是不同肌肉組織特---的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin; 其余兩種廣泛分布于各種組織中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大于90%,但在n-terminal同源性僅50%-60%,因此n-terminal常被用作actin的抗原。
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β-actin的蛋白水平通常不會發生改變,因此被廣泛用于western時上樣量是否一致的參照。也常被用于免0疫染色觀察細胞的微絲結構。在用作western的參照時,actin抗0體和tubulin抗0體的主要不同之處在于兩者所識別蛋白的分子量不同,山羊抗豬igg(h+l),這樣可以選擇合適的參照在同一塊膠同一張膜上實現同時檢測目標蛋白和參照蛋白。
保存條件:
actin抗0體-20℃保存,western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。western一抗稀釋液優先4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現輕微的渾濁和少量不溶物。
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血0清的分離
如果用三角瓶或平皿盛血,將器皿傾斜放置于37oc烘箱2hr,轉移到4oc沉淀過夜,第二天早上用吸管吸取血0清。如果用離心管收集,37oc烘箱放置2hr,轉移到4oc沉淀過夜,第二天早上離心,10000rcf,10分鐘。在血0清中加入nan3 至終濃度0.02%,分裝后-20oc保存。
小結:抗血0清獲得之前要件的抗0體的效價、抗0體的特---以及抗0體的親和力;獲得抗血0清之后,要分裝保存抗血0清,一般情況下,-20度可保存數月至數年抗0體的效價都不會發生變化。抗0體的效價可以通過瓊脂擴散試驗和酶聯免0疫吸附試驗進行鑒定。