凝膠阻滯遷移電泳檢測服務emsa
1、細胞準備：細胞傳到后，密度達到70％左右時進行轉染；
2、細胞轉染:取兩個ep管，一個加入opti-mem、質粒和包裝質粒；另一個加入opti-mem、lipo2000，然后將兩管混勻；
3、細胞孵育：將混合液逐滴加入細胞培養皿中，混勻后孵育；
4、收集---：轉染后48h、72h收集含慢---的上清；
5、滴度檢測:細胞為30%－50％時加入---上清液，檢測陽性細胞比例。
mirna測序
microrna(mirna)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子rna，是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈rna前體經過dicer酶加工后生成，pcr檢測，不同于sirna雙鏈但是和sirna密切相關。microrna通過和靶基因mrna堿基配對引導沉默復合體risc降解mrna或抑制mrna的翻譯，從而在轉錄后水平調控蛋白表達新發現mirna也能在轉錄水平調控基因表達。mirna在物種進化中相當保守，在動物、植物和---等中發現的mirna表達均有嚴格的組織特---和時序性。mirna在細胞生長和發育過程中起多種作用，包括調控發育、分化、凋亡和增殖等。
目前研究mirna的方法主要是realtime-pcr、生物芯片技術以及第二代測序技術。基于第二代測序技術的mirna測序，可以一次獲得數百萬條mirna序列，能夠快速鑒定出不同組織、不同發育階段、不同---狀態下已知和未知的mirna及其表達差異，為研究mirna對細胞進程的作用及其生物學影響提供了有力工具。
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