在玻璃燒杯中注入去離子水，加入depc使其終濃度為0.05%~0.1%depc-h2o。depc二焦---為活性很強的物，須在通風櫥中小心使用
將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入depc-h2o，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風柜中37℃ 或室溫下處理過夜。
將depc-h2o小心倒入廢液瓶中，將裝有depc- h2o 處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。
滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。
玻璃和金屬物品250 ℃烘烤3小時以上。
rna提取及注意事項
研究基因的表達和調控時，需要從組織或細胞中分離純化rna。rna的高低經常影響rt-pcr、cdna庫構建和northern blot等分子生物學實驗的成敗。
主要試劑
trizol是一種新型總rna抽提試劑，pcr檢測，內含異---胍等物質，能迅速破碎細胞，抑制細胞釋放出的---酶。
1.
trizol試劑含有，具有毒性和---性，注重操作。
2.
rnase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉，咸陽pcr，注重配帶手套，樣品盡可能蓋嚴。
3. 細胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低后得率，因為一部分rna會殘留在未裂解的細胞中。細胞裂解之后要看不見顆粒狀物質結締組織和骨除外。在清洗和裂解細胞時在低溫下操作，防止在操作過程中釋放的內源rnase降解了rna。
4. 酵母和一些---由于細胞壁的---結構，可以加入trizol試劑同時加入無rnase的玻璃珠并劇烈振蕩，使細胞裂解充分。
2-8℃ 避光保存一年。
dna測序檢測
1. pcr測序反應
(1)取0.2ml的pcr管，用記號筆編號，將管插在顆粒冰中，按下表加試劑:
所加試劑測定模板管標準對照管
bigdye mix
1μl
1μl
待測的質粒dna
1μ 1
pgem-3zf (+)雙鏈dna
-1μ1
待測dna的正向引物
1μ 1
m13(-21)引物- 1μ 1
滅菌去離子水
2μ 1
2μ 1
總反應體積5μ 1，不加輕礦物油或石蠟油，蓋緊pcr管，用手指彈管混勻，fish檢測，稍離心。
(2)將pcr管置于9600或2400型pcr儀.上進行擴增。98c變性2min后進行pcr循環，
pcr循環參數為96c 10s， 50c 5s， 60°c4min， 25 個循環，擴增結束后設置4c保溫。
2.---法純化pcr產物
(1) 將混合物離心，將擴增產物轉移到1.5ml ep管中。
(2)加入25μ 1/---混合液，充分振蕩，置冰上10min以沉淀dna。12 000r/min于
4c離心30 min，實時熒光定量pcr，小心棄上清。
(3)加70%(v/v)的---50μ 1 洗滌沉淀2次。12 000r/min 于4c離心5min，小心棄上清和
管壁的液珠，真空干燥沉淀10~ 15min。
3.電泳前測序pcr產物的處理。
(1)加入12μ 1的tsr于離心管中，劇烈振蕩，讓其充分溶解dna沉淀，稍離心。
(2)將溶液轉移至蓋體分離的0.2ml pcr管中，稍離心。
(3)在pcr儀上進行熱變性(95c 2min)，冰中驟冷，待_上機。
4..上機操作按儀器操作說明書安裝毛細管，進行毛細管位置的校正，人工手動灌膠和建立
運行的測序順序文件。
5.儀器將自動進行序列分析，并可根據用戶要求進行序列比較。如測序序列已知，可通過
序列比較以星號標出差異堿基處，提高工作效率。
6.測序完畢按儀器操作規程進行儀器清洗與保養。
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