rna pull down 檢測
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分子生物學檢測
分子生物學作為現代生物技術中zui為---的實驗手段之一，已經廣泛滲透到生命科學的各個領域，在基礎研究、醫l療診斷等領域均起到了非常重要的作用。
借助的技術優勢，英瀚斯生物特配備了高l效的儀器設備，如slan 48p 熒光定量pcr檢測系統、pcr儀、電泳儀、冷凍離心機、高速離心機等。目前公司可為您提供反轉錄pcr、熒光定量pcr、凝膠電泳遷移率等檢測服務，---縮短您的實驗周期、降低您的實驗成本。
分子與質粒載體構建
實驗原理
外源dna與載體分子的連接就是dna重組，這樣重新組合的dna叫做重組體或重組子。重組的dna分子是在dna連接酶的作用下，pcr檢測，有mg2+、atp存在的連接緩沖系統中，將分別經酶切的載體分子與外源dna分子進行連接。dna連接酶有兩種：t4噬菌體dna連接酶和大腸dna連接酶。兩種dna連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的dna分子連在一起的功能，而且t4噬菌體dna連接酶還有—種大腸連接酶沒有的特性，即能使兩個平末端的雙鏈dna分子連接起來。但這種連接的效率比粘性末端的連接效率低，一般可通過提高t4噬菌體dna連接酶濃度或增加dna濃度來提高平末端的連接效率。
t4噬菌體dna連接酶催化dna連接反應分為3步：，fish檢測，t4dna連接酶與輔助因子atp形成酶—amp復合物；然后，酶—amp復合物再結合到具有5磷酸基和3---切口的dna上，使dna腺苷化；后產生一個新的磷酸二酯鍵，實時熒光定量pcr，把切口封起來。
dna重組的方法主要有粘端連接法和平端連接法，為了防止載體本身的自連，可以通過(牛堿性磷酸酶)cip處理克服。
連接反應的溫度在37℃時有利于連接酶的活性.但是在這個溫度下，粘性末端的氫鍵結合是不穩定的。因此人們找到了一個折中溫度，即12-16℃，北京pcr，連接12-16h(過夜)，這樣既可大限度地發揮連接酶的活性，又---到短暫配對結構的穩定。
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