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(在使用這些清潔溶劑之前，可與柱子供應商協商，以---它們不會對填料造成損害。硅樹脂基質中的柱狀物一般都可以用，但是某些洗滌溶劑的配方可能導致有機聚合物基質的填充物膨脹或收縮，從而影響其色譜特性。)此外，---上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶，丙i醇可作為---的過渡。每一個溶劑系統至少要沖洗20個液柱體積。因為某些溶劑系統粘度較大，應相應調整沖洗流速，以---不超過泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過的柱子上，至少要用40~50柱體積的 hplc級純水進行沖洗。對反相柱來說，活性炭固相萃取柱選擇，不使用十二烷---酸鈉(sds)和 trition等表面活性劑，因為這些化合物一定會牢固地吸附到硅膠結合相柱上，因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是， separationgroup的研究表明：多肽合成過程中產生的保護基和清除劑對柱體的污染，可通過向流動相中加入500μ l1% sds溶液，以1 ml/min的速度清除。以5%~95% ebn/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后，在平衡起始條件下，柱體的多肽分離功能得以恢復。
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在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強度應逐漸增加。要---所選的樣本溶劑不會洗脫目標化合物，所選的淋洗劑應在不洗脫目標化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應能恰巧完全洗脫目標化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性---團之間會產生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力---，但比離子力更弱。常用的極性基團有---，胺基，巰基等。
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---小柱活化平衡的目的有二，一是使---團填料的粘附性和伸縮性保持對目標化合物的大吸附活性，另一種目的是去除填料本身可能引入的雜質。硅膠鍵合c18，是一種在硅膠微球表面粘結的疏水性c18---團，為使其對目標物保持充分吸附活性，需要在濕潤環境上樣物在填料表層形成的液膜(活化平衡)與上樣物的溶劑分子具有---的相容性，目標物在膜間進行傳質，與膠接c18發生疏水作用時，目標物與膠接c18本身并不具有水浸潤性，直接上樣物，c18蜷縮，而較強的疏水性則使其難以與目標物中的目標物分子充分接觸，活性炭固相萃取柱批發，因此， hlb小柱采用聚合物改性材料，增加了親水基團，使其在上樣物的環境中與目標物分子充分接觸，而發生傳質，使目標物在上樣物的環境中完全保留。
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反相萃取通常用于化合物的預處理，正如反相色譜是色譜中常用的分離方法一樣，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分后，活性炭固相萃取柱品牌，可方便地進行干燥、濃縮。
有些項目，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml洗脫，這個過程中洗脫和定容集是一步處理，---步處理必然會影響洗脫步驟的定量結果。
也就是溶劑互溶問題，當淋洗過程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑極性的差別較大時，就會產化分層，洗脫阻力大，洗脫液容易被稀釋等問題，造成洗脫效果不同，從而導致試驗結果。
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相對于弱酸性化合物而言，弱堿性化合物在陽離子交換固相萃取過程中99%的分解都是陽離子，商丘活性炭固相萃取柱，這一弱堿性化合物所處的環境系統的 ph值必須低于其 pka至少兩個 ph單位。洗脫時，環境體系的 ph值應高于化合物的 pka值至少兩個 ph單位，99%的化合物此時為中性狀態，可通過適當的溶劑從陽離子交換柱中洗脫。
選擇離子交換固相萃取柱的種類：為能有效地洗脫吸附在一起的離子化合物，對于含有強離子---團的目標化合物，一般選用弱離子交換柱；對于含有弱離子---團的化合物，一般選用強離子交換柱。該方法可避免目標化合物與吸附劑---團同時處于離子化狀態，使目標化合物始終保持在不能洗脫的保留狀態。
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反相式c18分離柱
c18是十八烷基碳鏈上的反相固定相的統稱。除以普通硅膠為基質外，以c18鏈為基質的高聚物小球、氧化鋁、氧化---等反相固定相，均可稱為c18鏈。有很多種類型的c18，常見的c18是硅膠基質，稱為 ods，c18能夠在純水中工作，被稱為c18-aq。
c18反相柱的固定相為非極性固定相，流動相極性大于固定相極性，常用的溶劑一般為水和甲1醇、乙1腈、---呋1喃、---1醇等與水互溶的溶劑，適合分離非極性或弱極性的化合物，其洗脫順序一般為樣品極性從高到低。
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