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一般來說,我們需要分離的混合物的性質各不相同,很難通過調整 ph來達到要求。一般而言,在改變流動相 ph的基礎上,又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數c18反相分離柱在使用
一、強酸淋洗、強堿
用硅膠作載體的粘結相填料,其使用要求是:流動相 ph值在2.5-7.5之間。在 ph<2時,流動相可能與載體硅膠和合相發生水解反應,從而導致碳鏈損失;在 ph<7時,流動相可能使載體硅膠溶解。因此,硅膠基體c18 (即 ods)在強堿條件下基本壽命較短,聚合體c18雖然能在高堿性條件下穩定工作,但其價格昂貴,分離性能及模組強度均不如 ods。
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改進凈化方式
在一般情況下,目標化合物模式比雜質模式的凈化效果要好,如果要分析的是某種特定種類的化合物,則較好是用保留目標化合物的模式來分析;舉一個簡單的例子,也就是對蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類堿性農1藥)進行分析,用陽離子交換柱可專一性地保留這些農1藥,使其與干擾物基本完全分離,而用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物,保留干擾物的數量較多。
此外,如果可以用多個 spe柱對目標化合物進行凈化,應選擇選擇性好的吸附劑;選擇性越高,離子交換>;正相>;反相。
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固相萃取(spe)是近年來發展起來的一種快速樣品制備技術,其富集、濃縮、提純樣品微量組分,其依據的是溶質在固-液相間的分配系數。通過萃取柱填充吸附劑,將樣品中的部分或全部成分吸附在柱上,然后用一種或幾種混合溶劑清洗,將雜質從萃取柱中分離出來,后用少量溶液快速洗脫分析物,從而實現快速分離、凈化、濃縮。
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采用的微球制備和表面功能化技術,研制了一系列固相萃取填料,具有的粒徑尺寸,高度均勻的粒徑尺寸,優良的比表面積和孔徑尺寸,-的化學穩定性,以及較寬的 ph適用范圍,可滿足對、-和-殘留的高靈敏檢測要求。
的微球制備及表面功能化技術,既能-填料粒徑和內部結構的一致性,又能帶來對目標物質的特-吸附、高回收率和再現性好等特點。
固相萃取填料由于其粒徑、比表面積和表面功能團密度的高度均勻性,將顛覆目前市場上采用尺寸不均甚至形狀不規則的固相萃取填料。用 beckman coulter counter測量了強耀生物固相萃取填料的粒徑分布,結果表明,該填料具有-的單一分散性,其變異系數為 cv<3%。固相萃取柱高度均一的固相萃取柱使其具有回收率高、載量大、選擇性高、洗脫集中、溶劑用量小等優點。
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對正相體系,先對目標化合物的正-溶液進行上樣,然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正-溶液對目標化合物進行洗脫,丙磺酸spe柱供應商,分別收集洗脫液的分析結果,建立淋洗曲線,確定目標化合物洗脫后的溶劑體系,丙磺酸spe柱價格,淋洗后的甲1基-1醚含量應略低于目標化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲1基-1醚的含量應略高于目標化合物正好被洗脫時的溶劑體系。
合理處理 spe柱,在 spe柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,丹東丙磺酸spe柱,有效活化可避免干擾物進入洗脫液中,活化溶液應選擇整個洗脫過程中洗脫強度zui高的溶劑體系。
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樣本制備問題
大部分流速問題是由于樣品制備不當造成的。例如樣品混濁、離心過濾不充分造成上樣時篩板堵塞,或樣品本身的蛋白質等大分子物質處理不當,造成有效蛋白沉降,造成篩板堵塞。通過改進前處理方法,可解決由這種原因引起的流速問題。因此,樣品準備是- spe正常流動速度的di一步。
小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)
充填粒徑的作用,大充填粒徑的充填越疏松,流動相阻力越小,流速越快;小充填粒徑的作用,充填越緊,流速越慢。這一現象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um,農殘級弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um,大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會比一般小柱要快,-是大孔硅藻土小柱,在使用時需要配以導流針來控制流速。