熒光現象的原理將熒光物體放到光譜中的各域,就可發現引起熒光的光線是光譜上波長較短的區域,即近紫外線區域,波長約為320-400nm。這種現象的實質是分子吸收了短光的能量波長越短,光能越強,又以發光的形式以波長較長和熒光射出,而為人眼可見,這就是熒光現象。熒光接近可見光的紅光端,大部分的熒光現象是符合這一規律的。熒光現象可分為兩種:1.次熒光現象;又稱固有熒光或自發熒光,當經紫外線的照射后,就能發出熒光的物質;2.第二次熒光現象:又稱激發熒光,當經紫外線照射后不能或只部分發生微弱的熒光,這樣就需先用熒光素處理,再經紫外線照射才能發生熒光,這是因組織內吸附或溶解有熒光素的緣故。
光學顯微鏡不同種類的照明光源早期的顯微鏡依靠油燈和自然的陽光,他們的原始但往往---確顯微鏡提供外部照明光源。他們往往雇用相當巧妙的方法,如收集光從一個大的白板上或在陰天的散射陽光的反射。不幸的是,這些方法沒有提供---的照明和經常視場照明的面積---超過物鏡的數值孔徑,引起眩光和水浸。光學顯微鏡不同種類的照明光源(圖1)現代顯微鏡通常有一個不可分割的光源,可以控制到相對高的程度。今天的顯微鏡常見的來源是白熾鎢鹵素燈泡的反射殼體中定位,投射光通過聚光透鏡到臺下聚光。通過可變的可變電阻器,通常集成到顯微鏡支架燈電壓控制。如圖1所示是一個典型的照明燈和住房。燈泡是一個操作上的12伏的直流dc電壓,徠卡金相顯微鏡經銷商,并產生---100瓦的功率進行照明的鹵鎢燈。燈電壓控制的直流電源,通常內置在顯微鏡殼體,徠卡金相顯微鏡供銷,用電壓控制旋鈕,邢臺徠卡金相顯微鏡,通常是一個電位器上的某個地方安裝顯微鏡支架。這些燈泡在操作過程中產生大量的熱量,在殼體上設置有散熱片的一些層,以幫助消散多余的熱量。燈泡的位置是由一系列的旋鈕控制照明器殼體的側面上,或預先為本專為殼體。燈箱的光通過聚光透鏡圖1引導到顯微鏡的基礎上,然后通過燒結玻璃擴散器的冷凝器上的孔徑光闌被-前經常。
熒光顯微攝影由于熒光圖像一般均較明場觀察暗得多,所以進行熒光顯微攝影需要較長的---時間,在---時應注意避免熒光顯微鏡震動。為了縮短---時間,徠卡金相顯微鏡銷售,可選擇倍率較低的攝影目鏡或感光度較高的攝影膠片如asa200以上或din24以上。熒光顯微鏡攝影技術對于記錄熒光圖像十分---,由于熒光很易褪色減弱,要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。因紫外光對熒光猝滅作用大,如fitc的標記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以,---速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統裝置。