分子實驗介紹——熒光定量pcr檢測
熒光定量pcr是檢測生物樣品中rna含量的普遍的方法，通過熒光染料或熒光標記的特---的探針，對pcr產物進行標記---，實時在線監控反應過程，---怎么做，結合相應的軟件可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。目前主要使用sybr green和taqman法對rna含量進行檢測。sybr green在低樣本量時成本較低，目前選用的較多。
sybr green i是一種只與dna雙鏈結合的熒光染料。當它與dna雙鏈結合時，發出熒光；從dna雙鏈上釋放出來時，熒光信號急劇減弱。因此，---多少錢，在一個體系內，其信號強度代表了雙鏈dna分子的數量。sybr green熒光染料-量pcr的基本過程是：1、開始反應，當sybr green染料與dna雙鏈結合時發出熒光。2、dna變性時，sybr green染料釋放出來，廣安pcr，熒光急劇減少。3、在聚合延伸過程中，引物退火并形成pcr產物。4、聚合完成后，sybr green染料與雙鏈產物結合，定量pcr系統檢測到熒光的凈增量加大。
實驗流程：細胞或組織rna提取-rna濃度檢測-rna逆轉錄-定量pcr檢測。
結果示例：
圖 a 基因擴增曲線圖；b 基因擴增溶解曲線圖；c mrna相對表達量變化
從圖中可以擴增曲線可以看出目的rna擴增效果，溶解曲線可以看出引物識別特---情況，通過使用δδct方法計算可以得到每個組中目的mrna表達變化。
蛋白質質譜鑒定服務
蛋白質protein是有機大分子，是構成細胞的基本有機物和生命活動的主要承擔者。蛋白質在催化生命體內各種反應進行、---、抵御外來物質入l侵及控制遺傳信息等方面都起著重要的作用。蛋白質的一級結構是---酸序列，通過鑒定---酸序列來匹配它的蛋白質，這是定性研究，是蛋白質組學的基礎，也是蛋白質組學的重要技術之一。
質譜一般由離子源、分析器mass ---yzer和離子檢測器detector三部分組成。傳統的質譜僅用于小分子揮發物質的分析，但隨著新的離子化技術的出現，如基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(maldi-tof)和電噴霧電離質譜(esi-ms)等，質譜技術的出現為蛋白質分析提供了一種新的途徑。現在蛋白質組學基本研究手段是：以生物質譜技術為-，對蛋白質進行-、高通量分離、鑒定和分析。
蛋白質質譜鑒定的基本原理是用蛋白酶將蛋白質---成肽段混合物，經maildi或esi等軟電離手段將其離子化，然后通過分析器將具有特定質核比的肽段離子分離開來。通過實際譜圖和理論上蛋白質經過蛋白酶---后產生的一級質譜峰圖和二級質譜峰圖進行的比對，進行蛋白鑒定。
rip
技術概述
rip是研究體內蛋白與rna互作的重要技術。該技術先用甲醛等試劑交聯細胞內的“蛋白-rna”互作復合物，裂解細胞后，用靶蛋白特異的抗l體(或標簽抗l體)做免l疫沉淀，獲得“靶蛋白-rna”互作復合物，去交聯分離其中的rna;針對預測的靶蛋白結合rna的序列設計引物，-，
做qpcr實驗，驗證預測的rna是否與靶蛋白有結合，或者將分離出來的rna做高通量測序，篩選到可能與靶蛋白結合的rna。
技術流程
細胞交聯-***細胞裂解-***免l疫共沉淀***去交聯***rna分離***建庫***高通量測序(或qpcr)。
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