發酵罐液體菌種取樣檢測方法
通常情況下,液體菌種-壞主要通過感觀方法來判斷,即看、聞、旋來決定菌種,大多數人往往由于經驗不足難以把握指標,因此經常出現判斷困難和失誤,給生產帶來影響和甚至造成損失。為解決上述問題,除正確按照生產工藝流程操作外,采取一種-檢驗方法,早期及時檢驗液體菌種,對保障生產-。下面介紹一套及時有效的液體菌種檢驗方法,此方法操作簡便、簡單易行。
1、檢驗材料
1.1 土豆200g、-20g、瓊脂18g--20g、蛋白胨5g、1水1000ml。將土豆洗凈切片加水1000ml,煮沸后10min--15min,用紗布過濾,采購發酵罐,取濾液1000ml,加瓊脂溶化后加-、蛋白胨分裝試管內,每管裝20ml,塞棉塞,包牛皮紙,高壓滅菌121℃--123℃,維持20分鐘,自然降1壓到零時,打開鍋蓋,擺成斜面,制作成試管斜面培養基備用。
1.2 把培養皿裝入耐高壓塑料袋中一同滅菌,然后稱熱將滅好的菌的試管內培養基在無菌條件下倒入培養皿。用250ml三角燒瓶或20mm×200mm空試管,打好棉塞,包上四層報紙放入高壓鍋內滅菌,常歸滅菌,冷卻后備用。
1.3 如果不制作試管斜面培養基,可將每次滅好菌的菌袋或瓶預留12個備用。
2、檢驗方法
2.1 取樣。液體菌種檢驗可分二次進行,-一次在培養24h--36h時取樣,第二次在培養36h—48h時取樣。因菌種不同,取樣時間也不相同,一般情況在進入快速生長期時取樣一次,在臨接種前48小時取樣一次。
化工設備具備的特點
整套化工生產裝置是由化工設備、化工機器以及其他諸如化工儀表、化工管路與閥門等組成,為-整套裝置的安全穩定-生產,要求化工設備要具有以下性能:
1要具有與生產裝置的原料、產品、中間產品等所處理物料性能、數量、工藝特點、生產規模等相適應;
2一套生產裝置,長沙發酵罐,無論連續和間歇生產,都是由多種多臺設備組成,因此要求化工設備彼此及與其他設備之間,設備和管道、閥門、儀器、儀表、電器電路等之間要有-的協同性和適配性;
3要求化工設備對正常的溫度、壓力、流量、物料腐蝕性能等操作條件,在結構材質和強度要有足夠的密封性能和機械強度。對可能出現的不正常,發酵罐品牌,甚至可能出現的-條件要有足夠的經受和防范、應急和處置能力;
4無論是連續或間歇化工生產裝置都需要長期進行操作使用。因此要考慮化工設備磨損、腐蝕等因素,要-有足夠長的正常使用壽命;
5在滿足上述條件的同時要優化化工設備的材質、選型、制造費用,效率和能耗,盡量達到1低;
6大部分各種結構和性能的化工設備也同樣適用于諸如煉油、輕工、食品等工業部門使用,因此具有通用性。
發酵液中的溶氧濃度dissolved oxygen ,簡稱do對微生物的生長和產物形成有著重要的影響。在發酵過程中,必須供給適量的無菌空氣,菌體才能繁殖和積累所需代謝產物。不同菌種及不同發酵階段 的菌體的需氧量是不同的,發酵液的do值直接影響微生物的酶的活性、代謝途徑及產物產量。發酵過程中,氧的傳質速率主要受發酵液中溶解氧的濃度和傳遞阻力 影響。研究溶氧對發酵的影響及控制對提高生產效率,-產品等都有重要意義。
一、溶氧對發酵影響
溶解氧對發酵的影響分為兩方面:一是溶氧濃度影響與呼吸鏈有關的能量代謝,從而影響微生物生長;另一是氧直接參與產物合成。
一溶氧對微生物自身生長的影響
根 據對氧的需求,微生物可分為專性好氧微生物、兼性好氧微生物和專性厭氧微生物。專性好氧微生物把氧作為終電子受體,通過有氧呼吸獲取能量,如霉菌;進行 此類微生物發酵時一般應盡可能的提高溶解氧(do),以促進微生物生長,增大菌體量。兼性好氧微生物的生長不一定需要氧,但如果在培養中供給氧,則菌體生 長-,如酵母菌;典型如-發酵,對溶do的控制分兩個階段,初始提供高do值進行菌體擴大培養,后期嚴格控制do進行厭氧發酵。厭氧和微好氧微生物能 耐受壞境中的氧,但它們的生長并不需要氧,這些微生物在發酵生產中應用較少。而對于專性厭氧微生物,氧則可對其顯示毒性,如產-桿1菌,此時能否-do 在一個較低值往往成為發酵成敗的關鍵。
溶解氧對微生物自身生長的影響體現在多個方面,其中對微生物酶的影響是不可忽略的重要因素。研究了不同溶 氧對谷氨酸發酵中兩個關鍵酶(谷氨酸脫氫酶gdh和乳酸脫氫酶ldh)和代謝流的影響,研究表明,在過低溶氧條件下,tca循環代謝流量減小,不-平衡 -酵解速率,從而-了ldh的酶活,使代謝流轉向乳酸生成,造成乳酸積累;而過高溶氧,gdh酶活明顯降低,且tca循環流量加大,生成大量 co2,造成碳源損失,兩種情況均不利于谷氨酸生成。
啤酒工業中,在啤酒的發酵階段,酵母的繁殖需要有足夠的氧氣,在除此之外的任何階段都應極 力避免氧的參與。啤酒發酵液總含氧量由酒體溶解氧和瓶頸空氣兩部分組成,一般情況下,啤酒中的含氧量超過2ppm時對生產就有明顯的危害。[3]因為氧氣 的存在會促使酵母采取有氧呼吸的代謝途徑,從而破壞-發酵的厭氧代謝過程。但是,供應發酵罐,研究表明無氧條件下發酵生成的-低于溶氧控制在1%-4%條件下生成 的-。這主要是由于無氧條件下的菌體量遠遠低于有氧條件下菌體量,而-的生成與菌體量有很大的聯系。
類似微生物發酵的活性污泥法處理污水的過 程中,do的影響及控制也十分重要。曝氣池中氧氣不足和過量都會對微生物生存環境帶來不利影響.當氧氣不足時,一方面由于曝氣池中絲狀菌會大量繁殖,終 產生污泥膨脹;另一方面會降低細1菌分解的效果,延長處理時間,甚至導致生物處理失效.而氧氣過量(即過量曝氣)則會由于絮凝劑遭到破壞而導致懸浮固體沉降 性變差,同時使能耗過高。