tcep 溶液，0.5m(tcep solution)操作步驟一獲得目的基因1、通過pcr方法：以含目的基因的質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)，pcr循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過rt-pcr方法：用trizol法從細(xì)胞或組織中提取總rna，以mrna為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cdna鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行pcr循環(huán)獲得產(chǎn)物。二構(gòu)建重組表達(dá)載體1、tcep 溶液，阻燃劑tcep 溶液，0.5m(tcep solution)載體酶切：將表達(dá)質(zhì)粒用-性內(nèi)切酶同引物的酶切位點(diǎn)進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收kit或凍融法回收載體大片段。2、pcr產(chǎn)物雙酶切后回收，在t4dna連接酶作用下連接入載體。
化學(xué)名稱：三(2-羧乙ji)lin[2]
英文名稱：tris(2-carboxyethyl)phosphinetcep
分子量：286.65
cas編碼：51805-45-9
理論氯含量：37.25%；理論磷含量：10.85%。
選用還原劑tcep(三羧已基鱗)作為打開二硫鍵的試劑，與酸性蛋白酶同浴處理羊毛。采用正交法設(shè)計(jì)酸性蛋白酶羊毛細(xì)化改性試驗(yàn)方案，確定了主要影響因素及水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:影響羊毛強(qiáng)力和細(xì)度的主要因素是tcep與蛋白酶的用量，而ph值與時(shí)間對(duì)細(xì)度與強(qiáng)力的影響不大。佳處理工藝為:tcep用量2%(owf)，阻燃劑tcep廠家，酸性蛋白酶用量2%(owf)，達(dá)州阻燃劑tcep，50℃處理90 min。經(jīng)過該工藝處理后的66支國(guó)產(chǎn)羊毛，細(xì)度下降1.393μm，強(qiáng)力保留71.2%。
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