該方法用于大多數蛋白質的定量是比較精que的,但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖-酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測定結果。如tritonx-100、sds、np-40等。
1.bradford濃染液的配制:將100mg考馬斯亮藍g-250溶于50ml 95%-,加入100ml85%的磷酸,然后,用蒸餾水補充至1000ml,此染液放4℃至少6個月保持穩定。
2.標準曲線蛋白質樣本的準備:盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標準品,例如測定抗ti,可用純化的抗ti作為標準。如果待測樣本是未知的,也可用抗ti作為標準蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標準曲線。
3.將待測樣本溶于緩沖溶液中,該緩沖溶液應與制作標準曲線的緩沖溶液相同(hao用pbs)。
4.按1:5用蒸餾水稀釋濃染料結合溶液,如出現沉淀,過濾除去。
5.每個樣本加5ml稀釋的染料結合溶液,作用5~30min。染液與蛋白質結合后,將由紅色變為藍色,在595nm波長下測定其吸光度。注意,顯色反應不得超過30min.
6.根據標準曲線計算待測樣本的濃度。
生產方法 由鄰磺酸-jia醛與a-n-乙ji--間甲ben磺酸在酸性介質中縮合成隱色體。再經-suan鈉或-氧化得到色素,中和后用-鈉鹽析,再精制而得。山東富舜新材料科技有限公司是集化學科研、開發、生產、銷售、服務為一體的綜合型企業。生產中,縮合反應一般需幾十小時,山西亮藍染料,如用-加尿素作為縮合劑,反應時間比僅用-為縮合物時可減少約1/5。
生產方法 亮藍的制備
由鄰磺基-jia醛與n-乙ji-n-(3-磺基-)--an縮合,再經-suan鈉或-氧化,反應結束后用純堿堿化,再用-進行鹽析得粗品。將粗品溶于水,再用-鹽析即得成品。亮藍鋁色淀的制備
由氯化鋁、硫酸鋁等的鋁鹽與碳酸鈉等的堿類制取-,然后添加于亮藍水溶液,沉淀而得產品。
生產方法 1亮藍制備。由鄰磺基-jia醛與n-乙ji-n-3-磺---an縮合,再經-suan鈉或二氧化鋁氧化,反應結束后用純堿堿化,再用-進行鹽析得粗品。將粗品溶于水,植物亮藍染料,再用-鹽析即得成品。
(2)亮藍鋁色淀制備。由氯化鋁、硫酸鋁等鋁鹽與碳酸鈉等堿類制取-,然后添加于亮藍水溶液,沉淀而得產品。
生產方法 由-醛磺酸與α-n-乙ben-)間甲ben磺酸的縮合物用-suan鈉或-氧化成色素,中和后用-鈉鹽析,再經精制而得?赊D化為鋁色淀。
亮藍,又名食用藍色1號日本、食用藍色2號,屬水溶性非-類著色劑。分子式c37h34n2na2o9s3,食用染料亮藍,相對分子792.86。亮藍為食用藍-素,屬于人工合成色素,是由-jia醛鄰磺酸與n-乙ji-n- (3-磺基-)--an經縮合、氧化而制得的。屬于-類化合物。高濃度的tris、edta、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、-銨和去污劑時測定有干擾?稍谑称贰-、化妝品等行業中作著色劑用。食品行業中適用于糕點、糖果、飲料等的著色。