PCR實(shí)驗(yàn)室-攀枝花PCR-南京英瀚斯生物科技(查看)

單核苷酸多態(tài)性( snp )實(shí)驗(yàn)

snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性 ，是由于單個(gè)核苷酸改變而導(dǎo)致的-序列多態(tài)性(polymorphism)。據(jù)估計(jì)，pcr實(shí)驗(yàn)室，在人類基因組中，攀枝花pcr，大約每千個(gè)堿基中有一個(gè)snp ，無(wú)論是比較于度多態(tài)性(rflp)分析還是微標(biāo)記(str) ，都要廣泛得多。

實(shí)驗(yàn)方法原理:

snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性，是由于單個(gè)核苷酸改變而導(dǎo)致的-序列多態(tài)性(polymorphism)。據(jù)估計(jì)，在人類基因組中，大約每千個(gè)堿基中有一個(gè)snp ，pcr，無(wú)論是比較于-性段長(zhǎng)度多態(tài)性(rflp)分析還是微標(biāo)記(str) ，都要廣泛得多。snp是我們考察遺傳變異的單位，實(shí)時(shí)定量pcr，據(jù)估計(jì)，人類的所有群體中大約存在一千萬(wàn)個(gè)snp位點(diǎn)。-般認(rèn)為，相鄰的snps傾向于一起遺傳給后代。 于是，我們把位于染色體上某一區(qū)域的一組相關(guān)聯(lián)的snp等位位點(diǎn)稱作單體型( haplotype b大多數(shù)染色體區(qū)域只有少數(shù)幾個(gè)常見的單體型(每個(gè)具有至少5%的頻率)，它們代表了一個(gè)群體中人與人之間的大部分多態(tài)性。-個(gè)染色體區(qū)域可以有很多snp位點(diǎn)，但是我們一-旦掌握了這個(gè)區(qū)域的單體型，就可以只使用少數(shù)幾個(gè)標(biāo)簽snps(tagsnp)來(lái)進(jìn)行基因分型，獲取大部分的遺傳多態(tài)模式。

mirna測(cè)序

microrna(mirna)是一種大小約21—23個(gè)堿基的單鏈小分子rna，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個(gè)堿基大小的單鏈rna前體經(jīng)過(guò)dicer酶加工后生成，不同于sirna雙鏈但是和sirna密切相關(guān)。microrna通過(guò)和靶基因mrna堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體risc降解mrna或抑制mrna的翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá)新發(fā)現(xiàn)mirna也能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因表達(dá)。mirna在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守，在動(dòng)物、植物和-等中發(fā)現(xiàn)的mirna表達(dá)均有嚴(yán)格的組織特-和時(shí)序性。mirna在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程中起多種作用，包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。

目前研究mirna的方法主要是realtime-pcr、生物芯片技術(shù)以及第二代測(cè)序技術(shù)。基于第二代測(cè)序技術(shù)的mirna測(cè)序，可以一次獲得數(shù)百萬(wàn)條mirna序列，能夠快速鑒定出不同組織、不同發(fā)育階段、不同-狀態(tài)下已知和未知的mirna及其表達(dá)差異，為研究mirna對(duì)細(xì)胞進(jìn)程的作用及其生物學(xué)影響提供了有力工具。