預(yù)制梯度等密度離心法。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、cscl、cs2so4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達(dá)與自身密度相等的梯度層，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。
自成梯度等密度離心法。某些密度介質(zhì)經(jīng)過離心后會(huì)自成梯度，離心管規(guī)格，例percoll，可迅速形成梯度，cscl、cs2so4和三碘------胺經(jīng)長時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合，離心開始后，阜陽離心管，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時(shí)，可以帶動(dòng)原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達(dá)與其自身密度相等的梯度層里，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。
離心力也可以用rcf相對(duì)離心力來定量。rcf通常表現(xiàn)為地球重力加速度的倍數(shù)。
rcf的計(jì)算公式是轉(zhuǎn)頭半徑乘以角速度平方，然后除以地球的重力加速度。
rcf通過下面的公式和rpm相關(guān)，其中r代表離心機(jī)的半徑，以厘米為單位。
對(duì)該公式的使用可能會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)的成功或失敗，但您不必在每個(gè)新的操作中都采用這種計(jì)算方法。離心機(jī)通常都附帶了圖表來幫助簡單地?fù)Q算rcf和rpm。用一個(gè)尺子連接離心機(jī)的半徑和一個(gè)已知的rpm數(shù)值，就可以得到rcf數(shù)值。
登錄后臺(tái)
