---的不銹鋼層析柱使用技巧
1)硅膠:硅膠是硅酸的部分脫水后的產(chǎn)物,其成分是sio2·xh2o,又叫縮水硅酸。柱色譜用硅膠一般不含粘合劑。
適用范圍:非極性和極性化合物,樹(shù)脂柱廠家,適用于芳香油、萜類(lèi)、甾體、、甙、---類(lèi)、酸性、酚性化合物、磷脂類(lèi)、脂肪酸、---酸,及一系列合成產(chǎn)品如有機(jī)金屬化合物等。
2)聚---:色譜用聚---主要有錦綸6聚己內(nèi)---)和錦綸66聚己二酰---)兩種,分子量一般在16000-20000,樹(shù)脂柱供應(yīng),其親水性和親脂性均較好,因此既可分離水溶性成份,也可分離脂溶性成分。
可溶于濃---、---及熱的、---胺和二---胺中;微溶于和等;不溶于醇、、、、---等;對(duì)堿穩(wěn)定,對(duì)強(qiáng)酸可水解。
層析柱的高徑比如何影響樹(shù)脂分離效果
分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,長(zhǎng)春樹(shù)脂柱,降低分辯力。在分離時(shí),死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000。
層析柱詳細(xì)的操作方法是怎樣的?
洗脫
以一定比例的一為洗脫液,樹(shù)脂柱多少錢(qián),60ml/min的流速進(jìn)行梯度洗脫,柱的使用壓力為2~3kg/c。按每份500ml收集,tlc檢識(shí)展開(kāi)劑一氯(2:8),顯色劑5%香草醛---液
至洗脫相同流份合并,回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加人適量熱溶后自然放置,析出結(jié)晶,為冬凌草甲素。
層析柱再生、平衡
有效成分經(jīng)tlc檢識(shí)全部流出后,用純5000ml再生,一(5:95)平衡后,可再次上樣,反復(fù)使用(使用次數(shù)隨原料不同而異,一般可連續(xù)使用2-6個(gè)月以上)。