骨sui內皮祖細胞的分離培養
方法:使用密度梯度離
心法汲差速貼壁法聯合的方法培養內皮祖細胞，293t細胞，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況及形態變化，使用dil標記的-化低密度脂蛋白和fitc標記的荊豆凝集素1雙熒光染色、流式細胞儀檢測細胞表面抗原cd34、cd133 表達情況.結果與結論:培養前4 d-不明顯第5~10天迅速增殖，并可見細胞集落及線狀結構形成培養第7天的內皮祖細胞具有吞噬dil標記的-化低密度脂蛋白和fitc標記的荊豆凝集素1的功能流式細胞儀檢測體外培養第十天的細胞，cd133+細胞占19.2%，cd34+細胞占28.7%，細胞培養，cd34+ /cd133+細胞占19.1%.說明密度梯度離心法聯合差速貼壁法可在體外有效分離培養大鼠骨sui內皮祖細胞.
細胞檢測服務
作為生物體結構和功能的基本單位，細胞在機體的各項-的生命活動中發揮著重要的作用，與此同時，細胞的生理過程，在一定程度上也是機體生命活動的反應。因此利用多種精密儀器，流式細胞，結合特-的檢測試劑，阿壩細胞，對體外培養的細胞直接檢測其增殖的基本過程，或對細胞進行不同的處理后檢測細胞生活周期內各項指標的變化，從而深入揭示細胞-的具體機制。
細胞實驗介紹——慢-建立穩轉細胞系
慢-包裝：公司使用3質粒慢-包裝系統，慢-系統使用plko.1-egfp、pspax2、pmd2.g，過表達慢-系統使用plvx-acgfp、pspax2、pmd2.g三質粒系統，將質粒混勻后使用磷酸鈣轉染方法轉染至hek293t細胞中，培養48h后，收集上清。使用genecopo公司慢-顆粒純化試劑盒將慢-純化。純化后留取部分檢測-滴度，其余-凍存于-80℃冰箱中。
滴度檢測：將-顆粒使用梯度稀釋，分別293t細胞，72h后，在熒光顯微鏡下觀察細胞熒光表達情況。根據細胞熒光量計算-滴度。
細胞：在-前-對細胞進行計數，接種約10000個細胞于12孔板中，培養過夜后使用無培養基稀釋-，加入12孔板中對細胞進行，-數量根據細胞的moi加入若無moi，需做-梯度：1，5，10，50，100 5個梯度對細胞，6h后去除含-溶液，加入完全培養基細胞培養，培養48h后，在熒光顯微鏡下觀察細胞熒光強度。同時加入puromycin對細胞篩選，篩選約2周時間。細胞篩選好后，使用定量pcr和western blot檢測目的基因的穩定表達情況。
實驗流程：慢-質粒構建-hek293t細胞培養-質粒轉染293t細胞--收集--純化--滴度檢測-細胞-穩轉細胞篩選-穩轉細胞鑒定
結果示例：
圖 a -滴度檢測；b 目的細胞-效果圖
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