使用前將各種試劑取出放置30分鐘，平衡至室溫。所有標準品和樣品必需設置平行對照實驗。
快速加入試劑至樣品中，立即漩渦震蕩2秒混勻。
1. 依據實驗鍵盤紙決定酶標條的使用量，將剩余的酶標條連同干燥劑一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。
2. 移取50μl中和液至各個微孔中，除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
3. 移取100μl 0.1m hcl至nsb(非特異結合)孔和b0孔(0 pmol/ml camp標準品)。
4. 移取100μl camp標準品至相應的孔。
5. 移取100μl樣品至相應的孔。
6. 移取50μl 0.1m hcl至nsb(非特異結合)孔。7. 移取50μl 偶聯酶至各孔中，除了ta(全活性)孔和blank(空白)孔。
8. 移取50μl 抗l體工作液至各孔中，除了ta(全活性)孔、blank(空白)孔和nsb(非特異結合)孔。
9. 將酶標孔置于孔板振動器上，250~500rpm，室溫孵育2小時。
10. 在吸水紙上拍干微孔內溶液，加洗滌液400μl每孔洗3次，每次需拍干。
11. 后一次洗滌，清空各微孔，在干凈的無塵吸水紙上輕巧酶標板數次，以---沒有洗滌液殘留。
12. 加5μl 偶聯酶至ta(全活性)孔。
13. 每孔200μl顯色底物溶液，于室溫靜置5~30分鐘。顯色底物a和b需在臨用前15分鐘內等體積混合，并避光放置。
14. 每孔加入50μl終止液。終止后立即讀數。
15. 清除酶標l儀blank(空白)孔值，c--- assaykit，讀取450nm處的光密度值，在570nm至590nm之間有修正。如果酶標l儀不能自動清除blank(空白)孔值，那么手動扣除每個讀數的blank(空白)孔光密度值。
elisa法是免l疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳l染病、寄生l蟲病及非傳l染病等方面的免l疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，認為elisa法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于---標本的檢查，而且由于---之內可以檢查幾百甚千份標本，因此，也適合于血l清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗l體，而且也可用于測定---中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的---方法。因此elisa法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大，
登錄后臺
