22.同樣的od用page檢測，eb染色為什么深淺不一？
答：通常可以用eb染色的方法來判斷雙鏈dna的量(如質(zhì)粒dna)，因為eb可以嵌合到雙鏈dna中。而合成的單鏈dna，由于堿基組成不同，形成二級結(jié)構(gòu)的可能性不同，eb的染色程度也會有差異，pcr引物設(shè)計，比如oligo(dt)等不形成二級結(jié)構(gòu)，eb染色效果就非常差。所以不要用eb染色的方法來定量，而用紫外分光光度計檢測。同樣道理，實時定量pcr，用eb染色來照片不適合所有引物。
23.引物不純會有什么后果？
答：引物不純可能會導(dǎo)致：1)非特-擴(kuò)增；2)無法用預(yù)先設(shè)計在引物5′端酶切位點的酶切開，-是沒有保護(hù)堿基的引物；3) 用于測序出現(xiàn)雙峰或亂峰。解決辦法重新合成或重新純化。
24.已經(jīng)溶解的引物，為什么原先使用正常，而過一段時間再使用就不好了？
答：如果溶解引物的水ph過低或污染了菌或-酶，會使引物降解。使用時沒有充分解凍混合，液體不均勻也可能會造成引物加入量不準(zhǔn)確。建議分裝引物，避免反復(fù)凍溶。建議使用10mmt ris ph7.5緩沖液溶解引物，因為有些蒸餾水的ph值比較低ph4-5， 引物在這種條件下不穩(wěn)定。還有一種可能性是引物沒有問題，而是pcr使用材料-是模板的與先前使用的不完全一致。
單核苷酸多態(tài)性( snp )實驗
snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性 ，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)
實驗方法原理:
snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)
腺-包裝原理介紹
腺-是一種沒有包膜的直徑為79-90nm的顆粒，由252個 殼粒呈二十面體排列構(gòu)成。每個殼粒的直徑為7-9nm。衣殼里是線狀雙鏈dna分子，兩端各有長約100bp的反向重復(fù)序列。人體腺- 已知有33種，分別命名為ad1-ad33，研究詳細(xì)得是ad2.
腺-是一種無包膜的球型結(jié)構(gòu)的-，遺傳物質(zhì)為線型 雙股dna形式。腺-的特點：1gan染范圍廣對人致病性低；2對增殖和非增殖細(xì)胞均具有g(shù)an染性；3能有效進(jìn)行增殖； 4-滴度高；5不整合到染色體中，無插入致突變性；(6)外源基因裝載容量大。由于腺-的這些特點使其廣泛地應(yīng)用于體 外基因轉(zhuǎn)導(dǎo)、體內(nèi)接種yi苗、和基因zhi療等各個領(lǐng)域。
實驗方法
1.獲得目的基因序列；
2.構(gòu)建-表達(dá)載體質(zhì)粒；
3.表達(dá)載體質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒重組；
4.gan染hek293，包裝出-；
5.-擴(kuò)增、濃縮；
6.滴度測定。
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