4. 各種細(xì)胞對(duì)凍存速度的要求也不一樣；上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些，－2~－3℃/ 分鐘合適；胚胎細(xì)胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開(kāi)始時(shí)，下降速度不能超過(guò)－10℃/ 分鐘。
5. 用什么防護(hù)劑合適和用量多大，要依細(xì)胞而定，初代培養(yǎng)細(xì)胞用 dmso 較好，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，一般細(xì)胞可用甘油；用量以較小為好。有人認(rèn)為膚上皮細(xì)胞貯存在 20%-30% 甘油中---。
6. 原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見(jiàn)，凍存一年后，應(yīng)再?gòu)?fù)蘇培養(yǎng)一次，然后再繼續(xù)凍存。
7. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作，雅安細(xì)胞，以免
8. 注意自身的安全，對(duì)于來(lái)自人源性或---的細(xì)胞株應(yīng)---小心。操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑例如 dmso，并避免尖銳物品-等。
細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染及解決方法
---污染
---污染后，培養(yǎng)基一般清澈，保持原色。細(xì)絲可以在顯微鏡下觀察到。，一些---類(lèi)似于---碎片，但其中許多清晰可見(jiàn)，看起來(lái)像珊瑚，比較容易區(qū)分。此外，它們會(huì)慢慢長(zhǎng)出細(xì)細(xì)的黑色細(xì)絲，因?yàn)樗鼈兩L(zhǎng)得比較慢，不像---那樣容易被發(fā)現(xiàn)，一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基被污染，它們將很難存活。
解決方法：一旦被---污染，果斷丟棄，然后對(duì)細(xì)胞房、co2 培養(yǎng)箱、器皿和培養(yǎng)基進(jìn)行消毒。
3d細(xì)胞培養(yǎng)
3d多細(xì)胞腫liu球是在體外應(yīng)用組織培養(yǎng)方法使腫liu細(xì)胞以多細(xì)胞集聚體的形式生長(zhǎng)成為具有三維結(jié)構(gòu)的球體。與傳統(tǒng)的2d貼壁細(xì)胞培養(yǎng)模型相比，3d多細(xì)胞腫liu球可以通過(guò)模擬三維細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用，從而貼近腫liu組織中相應(yīng)的病理生理特征。因此，單細(xì)胞測(cè)序， 3d多細(xì)胞腫liu球培養(yǎng)模型已經(jīng)逐漸應(yīng)用于gan細(xì)胞培養(yǎng)和分化、ai癥研究、yao物和毒性篩選及組織工程等特定應(yīng)用中。雖然3d多細(xì)胞腫liu球模型具有更---的實(shí)體腫liu生理相關(guān)性，但是與2d貼壁細(xì)胞培養(yǎng)模型相比，獲得大量相對(duì)統(tǒng)一的3d多細(xì)胞腫liu球模型需要-系列的培養(yǎng)過(guò)程和表征手段。
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