五、注意事項
1. 小宮設備和實驗程序與大鼠類似,但迷宮規格應比大宮小,以免增加小鼠行為操作難度。
2. 本實驗也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只選4個臂放置食粒。
3. 慢性應激對動物的迷宮操作可產生影響,動物模型構建,且存在性別差異。經過慢性應激以后,雄性大鼠---減弱,表現為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強,表現為錯誤頻率減少。
4. 即使在---進食條件下,也應讓大鼠體重每周增加5g,以免動物因營養---而患病。剔除身體狀態---的動物。
5. 迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標志。去除或移動這些標志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準確性。
2---運動睡眠剝奪法
此類睡眠剝奪方法形式多樣,在腦電監護情況下可行全部的睡眠剝奪和選擇性的睡眠剝奪。其共同特點是通過動力裝置迫使大鼠---地運動,從而達到睡眠剝奪的目的。此類方法的優點是睡眠剝奪效果明顯,睡眠剝奪的時間及強度易于掌握,重復性好,無須實驗人員---觀察實驗情況,減輕了實驗人員工作強度。缺點是長時間運動引起機體的一系列應激反應可能干擾睡眠剝奪的實驗結果,現選取其中兩種有代表意義的方法介紹如下
2.1水平轉盤睡眠剝奪法
此方法應用廣泛,于 1983 年先應用在睡眠剝奪實驗中,實驗裝置由一個電腦控制臺、一個水平轉盤及兩個開放的長方形有機玻璃缸組成,轉盤直徑為 46 cm,在電腦控制下可以按順時針逆時針方向隨機水平轉動! 兩只有機玻璃缸的尺寸均為長60 cm ,寬20.5 cm,---前動物實驗,高 60 cm 。在距離缸底 5 cm 處的缸側壁開有一條縫隙,使轉盤的一半能分別從縫隙伸入兩只玻璃缸中并能隨意轉動。缸底留置水約 2 cm 深,轉盤離水面約3 cm 實驗前1周將睡眠剝奪大鼠頭頸部植入微電極 并將微電極與電腦控制臺相連,將大鼠放在轉盤上適應環境1周,每天約1 h讓大鼠習慣在轉盤上活動,進水,進食等。實驗時將實驗組的大鼠及對照組的大鼠分別置于兩只缸中的轉盤上,當電腦通過微電極監測到實驗組大鼠進入慢波或快波睡眠的腦電信號后,立即發出指令使轉盤轉動 6 s(6 s內轉動 1/3 圈),當大鼠被轉到玻璃缸壁時,因被玻璃缸壁擋住而可能掉入水中,每次在實驗組睡眠剝奪大鼠進入睡眠時轉盤即轉動 6 s,方向隨機,轉盤轉動時兩只大鼠均被動地隨著轉盤移動。此方法一次只剝奪一只大鼠睡眠,當實驗組的睡眠剝奪大鼠在活動、進水、進食時轉盤并不轉動而此時對照組的大鼠則可趁機睡覺以彌補被剝奪的睡眠。此方法中睡眠剝奪組大鼠與對照組大鼠條件極其相似,因而可減少因實驗條件不同而所致的應激反應。
一、實驗材料
lpssigma公司
sd大鼠6周齡
二、實驗方法
sd大鼠用10%水合氯醛,動物模型實驗,仰臥固定于操作臺,動物模型,使用手術剪剪開頸部皮膚,暴露氣管,將lps1mg/kg注入氣管,飼養三周。