分子實驗介紹——印跡western blot檢測
通過sds-page凝膠將細胞或生物樣品內的蛋白按照蛋白分子量從大到小規律分離開。經過page分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體例如纖維素薄膜或pvdf膜上，自貢pcr，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的起反應，再與酶或同位素標記的第二起反應目前主要用hrp標記的第二，經過底物顯色或自顯影以檢測電泳分離的特---目的基因表達的蛋白成分目前主要使用魯米諾和二-的hrp反應發出熒光，通過儀器或者膠片顯色。該技術廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。
實驗流程：細胞收集-細胞裂解，蛋白提取-蛋白變性-sds-page電泳-蛋白質轉膜印記-蛋白封閉-目的孵育-二抗孵育-顯色拍照
結果示例：
圖 a不同大小的質粒轉染細胞后，western blot檢測圖片；b a蛋白不同培養時間后western blot檢測圖片；c 使用image pro plus軟件對a蛋白灰度檢測，a蛋白表達變化統計圖
甲l基化特---的pcr
herman 等 1996 在使用重---酸鹽處理的基礎上新建的一種方法。該方法敏感性高，主要用于作定性研究。用------鹽處理基因組dna，所有未發生jia基化的胞嘧定被轉化為尿嘧ding，而jia基化的胞嘧定不變；隨后設計針對jia基化和非jia基化序列的引物進行pcr。通過電泳檢測msp擴增產物，如果用針對處理后jia基化dna鏈的引物能得到擴增片段，---怎么做，則說明該位點存在jia基化；反之，說明被檢測的位點不存在jia基化。
特點：適用范圍廣，能夠檢測特異位點是否發生jia基化。
------鹽測序法bisulfite sequencing pcr，bsp
------鹽修飾后測序法 bsp frommer 等 1992 提出的研究 dna jia基化方法，此方法---性及jing確度高，能明確目的片段中每一個 cpg 位點的jia基化狀態。用------鹽處理基因組dna，所有未發生jia基化的胞嘧ding被轉化為尿嘧ding，而jia基化的胞嘧ding不變。隨后設計bsp引物進行pcr，在擴增過程中尿嘧定全部轉化為胸腺嘧定，zui后對pcr產物進行測序就可以判斷cpg位點是否發生jia基化，稱為bsp-直接測序法。將pcr產物克long至載體后進行測序，可以提高測序成功率，這種方法稱為bsp-ke隆測序法。
特點：jing確度高，能夠準確檢測出jia基化的程度百分比。
線粒體測序
線粒體是真核生物的重要細胞器，是生物體的能量工廠，參與能量代謝、信號轉導、細胞凋亡等許多生命活動，對生物的生理活動起著---的作用。大部分線粒體基因由于其母系遺傳特性以及進化速率較快等特點，被廣泛地用于種群遺傳學、進化生物學、譜系地理學和系統發育學、---診斷等學科領域。線粒體全基因組在生物進化的研究中具有的優勢。由于線粒體有著與真核生物長期共生的進化歷史，因此其基因組包含了反映物種進化的關鍵信息，同時，相對于核基因組，線粒體基因組小，---多少錢，容易對大量物種進行橫向的比較分析，有利于生物進化的研究，因而受到進化生物學家的---。線粒體的組成可以從兩個層面上反映物種及群體的遺傳和進化，即---序列組成和基因組的結構特征，兩者的特征具有不同的進化機制和進化速度，在進化生物學研究中可以---的互補。
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