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1. 魚-腺血管內皮生長因子(egvegf)elisa試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μl;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μl;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根-化物酶hrp標記的檢測抗體100μl,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液350μl,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次也可用洗板機洗板。
6. 每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μl,15min內,在450nm波長處測定各孔的od值。

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