瑞安市貝通汽配有限公司為您提供牛結核分支桿菌檢測試劑盒。【樣本要求】
1. 如使用原始標本進行檢測。標本---腦脊液、靜脈血、關節液；病畜靜脈血，乳汁；菌落，菌苔等應為新鮮采集并使用雙蒸滅菌水或滅菌生理鹽水懸浮的原始標本。
2. 如需在增菌后進行pcr檢測，則應使用選擇性增菌液對原始標本進行增菌。
3. 標本收集后若不能立即檢測，可置于2～8℃冷藏過夜保存；如需長期保存，標本應凍存于-20℃～-80℃。
【檢驗方法】
1. 試劑準備試劑準備區
1從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實驗所需試劑，充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體。
2核算當次實驗所需要的反應數n，并根據如下表所示反應體系計算當次實驗所需要的各種試劑量。
n =陰性對照數1t+陽性對照數1t+誤差預留量1t+樣本數
單反液配制表(每份)
pcr反應液
17.5 μl
混合酶液taq酶+ung酶
2.5 μl
(3)在無菌離心管中加入上述試劑，充分混勻后瞬時離心。按照20μl/管分裝量將試劑分裝至pcr反應管。
(4) 蓋緊pcr反應管蓋后將pcr反應管轉移至樣本處理區。剩余試劑放回-20℃以下冰箱冷凍保存。
2.樣本準備樣本處理區
用qiagen、roche公司提取試劑盒提取dna，具體操作按照其試劑盒說明書操。
3.加樣
在上述制備好的pcr反應樣本管中分別加入處理好的待測標本dna各5 μl、終體積25 μl/管，蓋好pcr反應蓋混勻后瞬時低速離心，轉移到pcr儀器上。陰性對照和陽性對照管則各加5 μl試劑盒自帶的陰性對照或陽性對照品，終體積為25 μl/管，蓋好pcr反應蓋混勻后瞬時低速離心，轉移到pcr儀器上。
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