上海谷研實業有限公司為您提供文氏密螺旋體探針法熒光定量pcr試劑盒。
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它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品rna模板。2. 引物和探針經過優化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. 特---高,引物是根據傘枝梨頭霉高度保守區設計,不會跟其他---的rna發生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應。
6. 本產品只能用于科研。
熒光定量pcr服務:
簡介:文氏密螺旋體探針法熒光定量pcr試劑盒實時熒光定量pcr技術于1996年由美國applied biosystems公司推出,該技術不僅實現了pcr從定性到定量的飛躍,而且與常規pcr相比,它具有特---、有效解決pcr污染問題、自動化程度---特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mrna表達量的變化;比較不同組織的mrna表達差異;驗證基因芯片,sirna干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量pcr技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量pcr儀器。1、熒光定量pcr服務要求:
01請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總rna大于 5 ug/樣品;或直接提供純化好的dna大于 5 ug/樣品。
02請提供已知的全長基因序列。
03請提供盡可能詳細的背景資料:dna/rna 來源等
2、熒光定量pcr操作程序
01引物探針設計與合成。
02提取dna/rna,樣本逆轉錄成cdna。
03進行real time pcr實驗,進行實驗結果分析。
04實驗完成后,提供完整的實驗報告含軟件分析結果及引物等實驗材料。
pcr實驗方法步驟:
文氏密螺旋體探針法熒光定量pcr試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×pcr buffer
5 μl dntp mix 2mm
4 μl 引物110pm
2 μl 引物210pm
2 μl taq酶 2u/μl
1 μl dna模板50ng-1μg/μl
1 μl 加ddh2o至 50 μl
視pcr儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置pcr儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s *** 58℃ 30s *** 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:傘枝梨頭霉探針法熒光定量pcr試劑盒結束反應,pcr產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:pcr的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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