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它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品rna模板。2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特---高，引物是根據(jù)傘枝梨頭霉高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他---的rna發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
熒光定量pcr服務(wù)：
簡(jiǎn)介：牛皮蠅蛆探針法熒光定量pcr試劑盒實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)于1996年由美國(guó)applied biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了pcr從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)pcr相比，它具有特---、有效解決pcr污染問題、自動(dòng)化程度---特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mrna表達(dá)量的變化；比較不同組織的mrna表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，sirna干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量pcr儀器。1、熒光定量pcr服務(wù)要求：
01請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總rna大于 5 ug/樣品；或直接提供純化好的dna大于 5 ug/樣品。
02請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。
03請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：dna/rna 來源等
2、熒光定量pcr操作程序
01引物探針設(shè)計(jì)與合成。
02提取dna/rna，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cdna。
03進(jìn)行real time pcr實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
04實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告含軟件分析結(jié)果及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
pcr實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×pcr buffer
5 μl dntp mix 2mm
4 μl 引物110pm
2 μl 引物210pm
2 μl taq酶 2u/μl
1 μl dna模板50ng-1μg/μl
1 μl 加ddh2o至 50 μl
牛皮蠅蛆探針法熒光定量pcr試劑盒視pcr儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置pcr儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s *** 58℃ 30s *** 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：傘枝梨頭霉探針法熒光定量pcr試劑盒結(jié)束反應(yīng)，pcr產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：pcr的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
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