上海谷研實業有限公司為您提供兔-羥化酶elisa試劑盒說明書。產品全稱:兔---β羥化酶 elisa試劑盒說明書
英文簡稱:rabbit dβh (dopamine-β-hydroxylase) elisa kit
貨號:goy-r6369
規格:48t/98t
服務:可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
公司“是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、---性強
4適用于---、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、---因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中aif水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗體、hrp標記的親和素,經過---洗滌后用底物tmb顯色。tmb在---化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的aif呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度od值,計算樣品濃度。
試劑配制:
1、酶聯板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根---化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根---化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
操作流程:
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
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