猴-白HELISA試劑盒說明書

上海谷研實業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒說明書。產(chǎn)品名稱
  猴-白h elisa試劑盒說明書
英文名稱
 monkey hbh (hemoglobin h) elisa kit
上海谷研實業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒規(guī)格。
優(yōu)點：
1.進口抗體----、靈敏、特異
2.操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3.的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，---性強
4.購買本公司的elisa試劑盒，免費代測
5.技術(shù)服務(wù)要求：，規(guī)范，
6.適用于---、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7.可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、---、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8.可檢測指標齊全：---因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9.經(jīng)濟、實惠、---，完善、穩(wěn)定的實驗體系，的科研隊伍，的實驗設(shè)備、準確---的實驗結(jié)果
 



試劑準備：

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oc)，試劑不能直接在37oc溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/ml。準備7個稀釋標準品的ep管，每個ep管中加入150μl的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/ml)直接作為空白孔。為---實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580ml蒸餾水或去離子水將20ml濃洗滌液稀釋至600ml，進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備：
elisa試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1血清
室溫---自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇edta、檸檬酸鈉或---作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。
5培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用pbsph7.2-7.4稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩�標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的pbsph7.4，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
 
注意事項：
1加樣：
實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用-針頭挑出；
為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
 
實驗流程:

猴-白h elisa試劑盒1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2.加樣標準品及樣本50μl，37℃孵育30分鐘；
3.洗板5次，加酶標試劑50ul，37℃孵育半小時；
4.洗板5次；加入顯色液a，b各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μl，立即450nm讀數(shù)。
6.計算


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