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1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號elisa試劑盒的不同組分(a液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時間的誤差，做大量標本時，孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響-，建議校對加樣器。
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