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1. 血管內皮細胞鈣依賴性粘附素酶免elisa試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μl；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μl；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根-化物酶hrp標記的檢測抗體100μl，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液350μl，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次也可用洗板機洗板。
6. 每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μl，15min內，在450nm波長處測定各孔的od值。
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